590 F. Fuhrmann. 



Zellen auf iiahruii<>sarme oder nahruiigsfreie Substrate zu l)riui>eu. die 

 feucht gehalten und dem Luft Sauerstoff leicht zugänglich sind. Wohl als 

 beste Unterlage bewährte sich der Gipsblock oder der in die Eprouvette 

 eingelegte ( Jipsstreifen. Zur Feuchthaltung dient steriles Leitungswassei-. 

 Der ursprünglich vou Engel schon angegebene (iipsblock wurde dann von 

 Emil Christian Hansen zweckentsprechend abgeändert und in dieser oder 

 ähnlicher Form auch jetzt für die Sporenuntersuchungen bei der Hefe 

 verwendet. Der (iipsblock ist ein Kegelstumpf von etwa 3 — 4: cm Höhe 

 und 5 6cm P.reite an der Basis; die obere Fläche besitzt einen Durch- 

 messer von 4: bctn. Man steht sich diese Gipsblöcke auf A'oi'rat selbst 

 her. indem man S liaumteile frischen (ups mit 3 Raumteilen ^^'asser zu 

 einem steifen Drei vei'rührt und diesen in eine entsprechende Dlechform 

 preßt, die aber nicht gefettet sein darf. Man steht dabei die Blech- 

 form mit der kleinen Fläche auf eine blanke (ilasplatte. Nach 2- 3 Stun- 

 den läßt sich der Block sehr leicht herausdrücken, sofern man daiaut 

 achtet, daß die lilechform keine Eindrücke hat. Der frische (iipsblock 

 wird ruin gi'ündlich in Wasser ausgekocht und dann in Filtrierpapier ge- 

 wickelt im Heil'iluftsterilisator bei 110" duich ein und eine hah)e Stunde 

 erhitzt. Dabei trocknet er stark aus und ist dann auch keimfrei. Jetzt ist 

 er gebrauchsfertig. ( ileichzeitig- bereitet man Schalen mit Deckeln vor, 

 die imr lose aufliegen und der Luft genügend Zutritt gestatten. Diese 

 Schalen soUen füi- di(^ angegebene (üpsblockgröße eine Höhe von 5 cm und 

 einen Durchmessei' \o\\ 8 cm aufweisen. Sie werden in Papier eingewickelt 

 und in der üblichen Weise trocken sterihsiert. 



Die Hefe muß für die Gipsblocksporenkultur ebenfahs vorbereitet 

 Averden. Man züchte sie möghchst in einem flüssigen Nährsubsti'at. und 

 zwai' in zwei (ienerationen. bevor man zur Sporenzucht schreitet. Nach 

 den Untersuchungen von Hansen^ Aderhold u. a. tritt bei Hefen die 

 Sporulation schwer ein, wenn sie längere Zeit in stark alkoholhaltigen 

 Nährsubstraten sich befunden haben. Jede ältere Kultur weist diese 

 Erscheinung auf. Demnach soU die Aussaat zur Sporengewinnung von 

 gutgenährten, jungen Kulturen erfolgen, die in optimalen Ernährungs- 

 bedingungen und Temperaturverhältnissen waren. Bierhefen wird man 

 demnach vorher in ungehopfter Bierwürze, Weinhefe in Most usf. züchten. Man 

 legt eine erste Vorkultur an. die man einige Tage bei Zimmertemperatur 

 hält. Wählen wii' als Beispiel Bierhefe. Diese verimpfen wir in einen Kolben 

 mit steriler, durchlüfteter, nicht gehopfter Bierwürze und lassen sie einige 

 Tage hindurch gären. Von der entstandenen Bodensatzhefe überimpfen 

 wir mit einem sterilen (ilasrohr in eine frische Bierwürze und züchten 

 nunmehr bei 25" C durch 24 Stunden. Es hat sich wieder Bodensatzhefe 

 g^ebildet. die nun auf einen (iipsblock übertragen wird. 



Dabei verfahren wir folgendermaßen: 



Der (jipsblock wird aus dem Papier gewickelt und ohne Finger- 

 bertihrung in die eröffnete, sterile Kulturschale geroht. Nun entfernt man 

 die über der Satzhefe stehende Flüssigkeit der zweiten Vorkultur durch 



