Fermente: Methoden zur Darstellung vou Fermenten. 7 



den erfordert. Die aufuetaute Masse wird im Acliatinörser mit pliysioloj^i- 

 sclier ClNa-Lüsung- verrührt und gröbere korpnskiiiiire Elemente abzentri- 

 fngiert, so dal.i eine opaleszierende Lösung übrig bleibt. 



Mehr auf die Verarbeitung von tierischen Organen zugeschnitten ist 

 die Zerkleinerungsmethode von Wiechowski^), die an anderer Stelle be- 

 schrieben ist. • 



Es ist nicht möglich und wäre auch eine unnötige Wiederholung, die 

 Darstellung aller gebräuchlichen Fermentpräparate zu l)eschreil)en. Als typi- 

 sche Beispiele mögen die folgenden genügen: 



Darstellung des Invertins. 



Verfahren von W. A. Osborne.^) 



Va kg Preßhefe wird zunächst mit y, ^ ^^ö^/oigem Alkohol angerieben, 

 nach 16 — 24 Stunden abfiltriert. Es geschieht dies hauptsächlich, um die 

 Eiweißkörper zu koagulieren. (Heute dürfte das nicht mehr nötig sein, da 

 man nötigenfalls nach L. Michaelis ^) nachträglich das Eiweiß leicht durch 

 Kaolin entfernen kann.) Der gut abgesaugte Rückstand wird mit nOO cm^ 

 Chloroform Wasser (f) ciii^ Chloroform auf 1 l Wasser) 6 Tage lang unter 

 häufigem Umschütteln bei oO — Hö° erhalten, dann durch große Faltenfilter 

 gebracht und das Filtrat gleich in 1 /-Gefäßen aufgefangen, die zu drei 

 Viertehi mit 96°/oigem Alkohol gefüllt sind. Der in dem Filtrat sich so- 

 fort bildende Xiederschlas: wird zuletzt auf ein Filter gebracht, mit Alkohol 

 gewaschen, im Valauim unter Schwefelsäure getrocknet. Zur Heinigung von 

 den Aschenbestandteilen erwies sich die Dialyse am wirksamsten. 



Verfahren nach L. Michaelis. 



Die Alkoholl)ehau(llung des vorher beschriebenen \'erfahrens. welche 

 die Entfernung der Eiweißkörper zum Hauptzweck hatte, kann auf folgen- 

 dem Wege umgangen werden, welcher darauf beruht, daß Kaolin alle Ei- 

 weißkörper, nicht aber das Invertin adsorbiert: 100 </ Preßhefe werden mit 

 der nötigen Menge Sand zerrieben. Es ist nicht nötig, die vollkommene 

 Zerreibung, wie zur Darstellung der Zymase, anzustreben. Dann wird die 

 Masse '6 — 6 Stunden mit 200 cm^ Chloroform wasser (1 cm^ auf 100 cn>^ 

 Wasser) geschüttelt und dann durch Filtrieren oder scharfes Zentrifu- 

 gieren der flüssige Extrakt vom P)odensatz getrennt. Es ist nicht nötig, 

 völlige Klarheit des Extraktes schon jetzt anzustreben. Dann werden je 

 100 cm» Extrakt mit 15 — 20f/KaoHn portionenweise unter Schütteln ver- 

 setzt. Man achte darauf, daß die Reaktion andeutungsweise sauer ist; 



1) Willi. Wiechoiv.'^ki, Eine Methode zur chemisehon und hiologisclien Untersuchung 

 überlebender Organe. i/o/w(eis^f/-.v Beitrage. Bd. 9. S. 232 (1907). 



^) W.A.Oshorne, Beiträge zur Kenntnis des Invertins. Zeitschr. f. pliysiol. Cheni. 

 Bd. 28. S. 399 (1899). 



^) L. Michaelis; Die Adsorptionsaft'initüten des Ilefe-lnvertins. IJioeliem. Zeitschr. 

 7. 488 (1908). 



