Fermente : Methoden zur Darstellung von Fermenten. 13 



der Kochsalzlösiino- auch Wasser nehmen) zu gleichen Teilen versetzt, einen 

 Tag- fi'eschüttelt, weitere 2 — i\ Tage im Eisschi'ank aufbewahrt, dann filtriert, 

 in kleine, braune Fläschchen eingefüllt und der Korken mit Paraffin ge- 

 dichtet. Diese Stammlösungen sind auf Eis aufbewahrt außerordentlich 

 haltbar; je konzentrierter, um so besser. 



Wenn man sich aus einem trockenen Fermentpräparat an verschie- 

 deneu Tagen exakt vergleichbare Lösungen für (juantitative Zwecke 

 her.'^tellen will, so beachte man, daß viele festen Ferment präparate 

 zum überA\iegenden Teile aus wasserunlöslichen Verunreinigungen bestehen, 

 welche das gesamte, in ihnen enthaltene Ferment nur sehr allmälilich an 

 das Wasser abgeben. Man bekommt daher bei nicht restlos löslichen Prä- 

 paraten niemals Lösungen von vöUig gleichartiger Zusammensetzung, wenn 

 man das Pulver nicht mindestens 24 Stunden mit dem Wasser in Pieriih- 

 rung läßt. Auch müssen die äußeren Bedingungen, namentlich die Tem- 

 peratur während des Auslaugens des Präparates einigermaßen konstant 

 gehalten werden. Es ist nändich ein festes Fermentpulver durch einmalige 

 Auslaugung niemals zu erschöpfen, sondern es scheint sich ein (ileich- 

 gewicht herzustellen, welches von der Temperatur abhängig ist. Will man 

 also z. B. eine jederzeit reproduzierbare Trvpsinlösung bereiten, so rate ich 

 zu folgendem Verfahren. Man hält sich eine möglichst große Menge eines 

 käufhchen Trypsinpräparates vorrätig, entnimmt einen Tag vor Anstellung" 

 der eigentlichen Versuche 0'2 g desselben und hkst es in 20 cy/^MVasscr. 

 indem man es während der ersten 2 Stunden öfter umschüttelt und dann 

 bis zum nächsten Tag im Eisschrank stehen läßt. Am nächsten Tage wird 

 die Lösung filtriert, die ersten Tropfen des Filtrates werden verwoiieu, 

 um eine etwaige Adsorptionsaffinität des Filtrierpapieres zum Ferment erst 

 abzusättigen. Diese Lösung brauche man nur für einen, höchstens für zwei 

 Versuchstage. Im allgemeinen dürfte eine solche Methode der Aufbewahrung- 

 in Lösung für längere Zeit vorzuziehen sein. Energisches Sehütteln von 

 Fermenten im Schüttelapparat ist dagegen zu vermeiden, weil viele Fer- 

 mente dadurch erheblich an Wirksamkeit einbüßen. So berichten Abderhalden 

 und Guggenheim'^), daß Tvrosinase sowie die peptolytischen Fermente des 

 Hefepreßsaftes durch 48stündiges und auch kürzer dauerndes Schütteln ilire 

 Wirksamkeit einbüßen. Ivs tritt bei letzterem dabei eine Trübung ein. 

 Auch sonst Avird ein solches \'orkommen berichtet. ^Vahrscheinlich beruht 

 diese Erscheinung auf derselben L'rsache, aus der eine Eiweißlösung biMin 

 starken Schütteln koaguliert; es bilden sich fortwährend neue Oberflächen, 

 an denen eine irreversible ..Häutchenbildung- stattfindet. Es wäre das 

 also eine auf Adsorption an der Oberfläche beruhende Veränderung. Nach 

 Slgne und Sigval Schmidt-Nielsen'-) ist Lablösung gegen Schütteln ganz 



^) E. Abderhalden und M. Cufigenheim , Versuche über die Wirkung der Tvro- 

 sinase etc. Zeitschr. f. physiol. Chemie. Bd. 54. S. 352 (1908). 



-) Sif/ne und Sir/ral S'climidf-Xitlseii , Zur Kenntnis der ..Schüttelinaktiviornnir'' 

 des Labs. Zeitschr. f. physiol. Chemie. Bd. 60. S. 42Ü (l'Jüy». 



