Fermente : Methoden z. (|iuilit. u. (|iiaiitit. \'erfolgiing d. Fermentwirkung. 29 



;■). Man stelle sich von der unbekannten, /ii iintersuehenden Fernient- 

 lösung- Vei-(liinnnni;en her in folgender Weise: 



Man fülle <s Iieaiienzfiläser mit je 1 cm'^ destilliertem Wasser. .Man 

 nehme dann eine trockene Pipette von 1 cm"' Inhalt, entnehme 1 cm^ dei- un- 

 bekannten Fermentflüssii^ktiit und i^ebe sie in das erste liöhrchen. Die 

 Pipette sei auf vollkommenes Ausblasen g'eeicht. Man blase sie in das 

 Pteagen/glas aus, vermische gut, indem man mehrere Male mit derselben 

 Pipette aufzieht und ausbläst. Dann entnehme man 1 cii/'-^ der Mischung 

 mit derselben Pipette und übertrage sie in das zweite Pteagenzglä sehen. 

 Man mische ebenso und übertrage wieder 1 cm^ in das dritte Reagenz- 

 g'läschen und so fort. Solange wird stets die gleiche Pipette benutzt. Xun 

 setze man zu jedem dieser Pöhrchen 5 ctn^ der Kicinaufschwciiniiung. 

 Das kann mit einer Pipette von 2r> ciii^ geschehen, aus der man je 

 5cw;3 abläßt. Das Einfüllen der Ricinlösung in die sämtlichen Gläser werde 

 rasch vorgenommen, so daß es im ganzen eine halbe Minute nicht über- 

 schreitet, am besten in einem mit Eiswasser gekiUilten 

 Wasserbad. Man notiere die Zeit und setze alle Piihrchen 

 auf einem Gestell (Fig. 10) in ein Wasserbad, dessen 

 Temperatur man entweder durch geeignetes einfaches Re- 

 guheren der Erhitzung oder durch einen automatischen 

 Regulator mögUchst konstant hält, auf 38''. Man notiere die 

 Zeiten, zu denen die Ricinlösung in den verschiedenen 

 Proben gerade aufgehellt ist. Dasjenige Röhrchen, welches 

 25 Älinuten verbraucht, ist von derselben Fermentkonzen- 

 tration wie die Testlösung, die als willkürliche Einheit 

 angenommen war. Es sei in unserem \^ersuche das dritte Röhrchen der 

 Reihe , mit der Verdünnung 1 : 8. Dann ist die ursprünglich zu prüfende 

 Fermentlösung 8mal so stark wie eine Lösung von ()-2 g des angewandten 

 Testpräparates in 100 cm ^ Wasser, entspricht also einer Lösung von l'O^ 

 des Test-Pepsin in 100 cm^ Wasser. 



Die Reaktion muß in allen Röhrchen genau gleich sein. AN'enn nun 

 die zu prüfende Fermentlösung eine wesentlich andere Reaktion hat als die 

 Testlösung, wenn also z. B. natürlicher Magensaft mit einer neutralen Lö- 

 sung eines festen Pepsinpräparates verglichen werden soll, so neutralisieri' 

 man den Magensaft vorher genau und berücksichiige die dadurch ge- 

 schaffene Änderung des Volumens. 



In diesem Falle, wo es sich um eine direkte Aufhellungsreaktion 

 handelt, erkennt man den gewünschten Endpunkt der Fermentwirkung 

 direkt. Bei anderen Methoden, z. B. Trypsinbestimmung mit der Kasein- 

 methode, entnimmt man mit einer Pipette von Zeit zu Zeit Pröl)chen und 

 setzt das geeignete Reagens , in diesem Falle also z. P>. stark verdünnte 

 Essigsäure, zu. 



Auf die hier beschriebene Weise wird unter anderem auf die ein- 

 fachste Weise das höchstwichtige Postulat erfüllt, daß das Gesamtvolumen 

 in allen Röhrchen das gleiche ist. 



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Fig. 10. 



