Fermente: Darstellung von Oxydasen und Katalasen etc. (51^ 



0*05 — 0'P/oi»^ii^ NaHCOa) tlie Flüssigkeit rasch goldgelb und mit der 

 Zeit orangegelb, aber nie rot. Solange die Reinigung der Tyrosinase nicht 

 soweit fortgeschritten ist, daß eine rote lieaktion mit p-Kresol ausbleibt, 

 so muß dieselbe als mit Aminosiiuren verunreinigt betrachtet werden. 



Spuren von Glykokoll, Alaniii, Leucin etc. genügen ('/,ooooo), uni diese 

 gelbe Farbe rasch in Rot überzuführen. War die Lösung am Anfang 

 schwach alkalisch, so geht die schön kirschrote Farbe (man lasse die Rea- 

 genzgläser ruhig stehen) von unten nach oben in N'iolctt und zuletzt in 

 Blau ülier. Je nach der Stärke der Tyrosinase nimmt der Umschlag von 

 Rot in Rlau 2 Stunden bis 1 Tag in Anspruch. Lösungen von p-Kresol zu 

 Viooooo zeigen noch diese schöne Reaktion. Lösungen von P/oigein Kresol 

 verlangsamen die Reaktion; sie kommt am besten zustande bei einer Kon- 

 zentration von Vi 000- Die rein blaue Endfarbe zeigt einen metallischen, 

 schillernden, roten (fuchsinartigen) Dichroismus. 



Pyrogallussäure wird ebenfalls oxydiert. Die rotgelbe Farbe ist der 

 durch Lakkase hervorgerufenen ganz ähnlich: Purpurogallinbildung wurde 

 aber bis jetzt nicht sicher beobachtet. Tyrosinase vermag weder Guajak 

 noch Guajakol zu oxydieren. 



Es werden auch durch reine Tyrosinase oxydiert (in Gegenwart von 

 Glykokoll oder anderen Aminosäuren mit Farbenumschlag wie beim p- 

 Kresol): 



Tyrosinhaltige Polypeptide, wie 1-Tyrosinanhydrid , Glycyl-1-tyrosin- 

 anhydrid , Glycyl-1-tyrosin , d-Alanyl-glycyl-1-tyrosin, 1-Leucyl-glycyl-l-tyrosin, 

 Tetrapeptid aus Seide ( 1 1-Tyrosin, 1 d-Alanin und 2 Glykokoll) (nach Chodat 

 und Abderhalden). Die Farbenreaktionen sind jedoch nicht dieselben wie 

 mit Tyrosin. Da aber diese Untersuchungen nicht mit reiner Tyrosinase 

 (außer den von Chodat ausgeführten) ausgeführt worden sind, sind die be- 

 treffenden Angaben nicht ganz eindeutig, da die Verunreinigung mit unbe- 

 kannten (xemengen Aminosäuren die spezifische Reaktion verschieben kann. 



Phenylalanin gibt keine Farbenreaktion und wird wohl sonst nicht 

 angegriffen. 



Es ist bei solchen Untersuchungen auf Polypeptide auch darauf zu 

 achten, daß der Tyrosinase kein peptolytisches Ferment aidiaftet. Die 

 Gegenwart eines solchen ist, wie folgt, nachzuweisen: 1. durch I^estimmung 

 des Drehungsvermögens im Polarimeter (falls asymmetrische Körper zugegen 

 sind; 2. durch Zusatz von peptolytischen Fermenten (Trypsinj und \'er- 

 gleichung der Reaktionen mit und ohne dieses Ferment. 



Es läßt sich auf diese Weise leicht dartun, daß die erwähnten tyrosin- 

 haltigen Polyeptide als solche oxydiert werden, und daß der (Jxydations- 

 wirkung keine hydrolytische Spaltung vorangeht. 



Wie gesagt, wird 1-Tyrosin von reiner Tyrosinase zuerst in einen 

 schön rosaroten Körper umgewandelt; später geht die Farbe in Schmutzig- 

 violett über und zuletzt entsteht ein schwarzer Niederschlag, der sich mit 

 der Zeit ausscheidet und absetzt. Dieses schwarze Endprodukt ist Melanin 

 genannt worden (vide: Zur Kenntnis der melanotischen Pigmente und der 



