Fermente: Darstellung von Oxydasen und Katalasen etc. 63 



haltend), steigende Mengen Fermentlösung und Wasser bis auf 50 c«? =^ Die 

 Glaser enthalten der Reihe nach 0'5, 1, l"ö, 2, 5, 10, 15, 20 cm ^ Ferment- 

 lösung. Die Keaktionsgemische werden 24 Stunden hei Zimmertemperatur 

 stehen gelassen, dann mit je 1 cm'^ lO'Voig'^i' Schwefelsäure angesäuert und 

 mit 0'002 n-I'ermanganatlösung bis zur Entfärbung titriert. Gleichzeitig 

 mit der ersten Reihe wird eine zAveite Reihe von Gläsern unter genau 

 gleichen Bedingungen mit den Reagenzien beschickt. Die Titration erfolgte 

 hier nach 48 Stunden. 



Fcrmciitkouzentration O'ö l'O Ib 2-0 ö'O IQ-Q 15-0 20-0 



A. 24 Stunden lO'S 14-2 17-n 19*8 25-7 30-4 3.H-Ü ;\o-S 



B. 48 ,, in-2 16-0 17-8 20-4 25-6 ai-2 84-4 35-4 

 Es ist dies eine logarithmische Kurve; die Menge des Reaktions- 

 produktes steigt mit der Fermentmenge, wenn auch langsamer als letztere; 

 die Reaktion kommt um so schneller zu einem Stillstand, je größer die 

 Fermentkonzentration ist. 



(/^Methode von Chodaf und Staub.'') Bei einer anderen Methode 

 bestimmt man die Wirkungsweise kolorimetrisch. Es werden 0"5^ Bismarck- 

 braun, O^ö g Korallin in 250 cm^ absolutem Alkohol gelöst (P). 



Da bei dieser Methode die Rötung der Tyrosinlösung bestimmt wer- 

 den muß und es sich gezeigt hat. daß andere Farbeunuancen am Anfang 

 und später zu beobachten sind, so haben genannte Autoren zwei Skalen 

 hergestellt. 



I. Skala für Spätreaktionen. 



\'on der alkoholischen Farb- 

 stofflösung P .... et» 3 1 1-5 2 2"5 3 3'5 4 45 5 

 Absoluter Alkohol ... ,, 19 18-5 17 17-5 17 l(')-5 10 15-5 15 



IL Skala für Anfangsreaktionen. 



\'on der alkoholischen Farbstofflösung P cw'^ 04 0-2 O-n 0-4 0-5 

 Absoluter Alkohol . ., 199 19-8 19-7 19(; 19-5 



Zur Synthese der Tyrosinase. 



Es ist oben gezeigt worden, wie man die Lakkasewirkung duich ilie 

 eines Systems Peroxydase — Hydroperoxyd ersetzen kann. Es läßt sich alier 

 Tyrosinase durch dieses System nicht ersetzen. Tyrosin wird dabei nicht 

 oxydiert, d. h. durch Hydroperoxyd unter Zusatz von Peroxydase. 



Nun läßt sich aus der Wurzel vonVicia Faba und aus dem Stengel 

 von Philodendron monsteroides eine Peroxydase ausziehen, die in 

 \'erbindung mit Wasserstoffsuperoxyd die charakteristische Rötung des 

 Tyrosins sowie die Tyrosinasereaktion auf p-Kresol liefert. 



Durch anhaltendes Erhitzen auf 100" wird diese Peroxydase zerstört 

 (es ist die gewöhnliche Peroxydase), aber es bleibt in der Lösung ein in der 

 Siedehitze beständiger Körper, welcher, einer Peroxydase aus ^leerrettig 

 zugesetzt, die charakteristische Tyrosinasereaktion liefert. 



') W. Staub, Nouvelles recberches sur la Tyrosinase, 1. c. 



