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E. Zunz. 



behandelt und die so erhaltene wässerige Lösung mit Alkohol gefüllt. Man 

 wiederholt mehrmals das Auflösen in Wasser und die Alkoholfällung. Der 

 Niederschlag wird schUetilich mit wasserfreiem Alkohol ausgewaschen und 

 darauf in Wasser aufgelöst. Zu dieser Lösung fügt man IVoig«" Essig- 

 säure, filtriert, erwärmt das Filtrat einige Zeit auf 4", filtriert und 

 alkaliniert die wieder erwärmte Flüssigkeit merklich. Nach Entfernung 

 durch Filtration des dabei etwa entstehenden Niederschlages wird die 

 Flüssigkeit bei 40° eingedunstet, um das Tvrosin zur Abscheidung zu 

 bringen, und nachher der Dialyse unterworfen. Das in Lösung l)efindliche 

 Trypsin wird durch wiederholte Fällung mittelst Alkohol gereinigt. 



Martin Jacohy zerhackt Bauchspeicheldrüsen vom Ilinde und überläßt 

 sie der Autolyse im Brutschranke während einiger Wochen, wonach vom 

 ungelösten Rückstande abfiltriert wird. Das Filtrat bleibt noch während 

 einiger Minuten im Brutschranke. Dann wird es mit Ammonsulfat versetzt, 

 um eine Salzkonzentration von 65°/o zu erreichen. Nach mehrstündigem 

 Stehen filtriert man und sättigt das Filtrat mit Ammonsulfat. Der dabei 

 entstehende Niederschlag wird mit gesättigter Ammousulfatlösung gewaschen, 

 dialysiert und schlieljlich in P/oiger NaCl-Lösung gelöst. 



Mays war auf mehrfache Weise durch verschiedene Aussalzungs- 

 methoden bestrebt, aus Pankreasextrakten ein eiweißfreies wirksames Trypsin- 

 präparat herzustellen. Diese Verfahren ergeben aber leider nicht stets 

 dieselben Ergebnisse. Am meisten empfiehlt Mays die fraktionierte Magne- 

 siumsulfatfällung, d. h. die vollständige Sättigung des vom bei Halbsättigung 

 mit Magnesiumsulfat entstandenen Niederschlage abfiltrierten Filtrates, 

 oder die Sättigung mit Ammonsulfat von vorher bis zur Sättigung mit 

 Kochsalz versetzten Pankreasextrakten. Man erhält dabei oft nur einen 

 mehr oder minder großen Teil des Enzyms. Man soll die Aussalzung bei 

 40" C anstellen. Bei der weiteren Reinigung der so dargestellten Präparate 

 ist es schwierig, eine Abnahme der Wirksamkeit des Trypsins zu vermeiden. 



Schwarzschüd hat nach folgender Vorschrift eine wirksame, keine 

 Biuretreaktion darbietende Trypsinlösung bereitet: Rinderpankreas werden 

 zu feinem Brei zerhackt, mit wenig Natriumbikarbonat versetzt und mit 

 Toluol überschichtet. Dieses Gemenge wird auf der Schüttelmaschine 

 tüchtig durchgeschüttelt und darauf während 5 — 6 Tagen der Selbst- 

 verdauung überlassen. Dann wird kollert und bis zum Erzielen einer 

 klaren Flüssigkeit filtriert. Letztere wird, um die Proteine zu entfernen, 

 mit gesättigter Uranylacetatlösung und dann sofort, um die Reaktion 

 alkalisch zu erhalten, mit Natriumphosphat versetzt. Der das Trypsin 

 enthaltende voluminöse Niederschlag wird abfiltriert und dann in der Reib- 

 schale mit 0"2'Yoiger Natriumkarbonatlösung ausgezogen, wobei sämtliches 

 Ferment in die Lösung übergeht, falls man den Niederschlag mindestens 

 12 Stunden mit der Karbonatlösung stehen läßt. Schließlich wird filtriert: 



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das Filtrat enthält das Trypsin. i) 



W. Kühne, Über das Trypsin-Enzym des Pankreas! Verl), d. Xaturhist.-.Med. 

 Ver. zu Heidelberg. N. F. Bd. 1. 8.194—198 (1876). — Martin Jacobij, Über die 



