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A'oliimen 90"/oigen Alkohols und etwas Tierkohle, erwärmt sie zum Sieden 

 und filtriert sie noch heiß ab. Das Filtrat wird auf dem Wasserbade unter 

 Zusatz von Alkohol von Zeit zu Zeit eingedampft bis zum Erscheinen eines 

 Kristallbreies beim Erkalten. Die so erhaltenen Tryptophankristalle werden 

 aus Tö^oigem Alkohol mehrmals umkristallisiert. Das nach der Fällung- 

 des Cystins und des Tryptophans in der Yerdauungsflüssigkeit durch 

 Mercurisulf at erzielte Filtrat wird mittelst Schwefelwasserstoffes vom Queck- 

 silber befreit und kann nach Abfiltrieren vom Quecksilbersulfid mit Phos- 

 phorwolframsäure versetzt werden, um auf Amino- und Diaminosäuren ge- 

 prüft zu werden. 1) 



2. Quantitative Bestimmung des Tryptophans nach Levene 

 und Rouillier. 



Das \'erfahren von Hopkins und Cole erlaubt keine genaue quanti- 

 tative I'cstimmung des Tryptophans. Beim Zusatz von Bromwasser zu einer 

 Tryptophanlüsung färbt sich diese purpur. Diese Färbung wächst zuerst in 

 Intensität mit dem Bromzusatze; sobald sie aber ihr Maximum erreicht 

 hat, verschwindet sie plötzlich bei Zufügung eines weiteren Tropfens des 

 Bromwassers. Diese Eigenschaft benutzen Levene und Rouiller folgendc^r- 

 maßen zur quantitativen Bestimmung des Tryptophans : Die Lösung der 

 Verdauungspi'odukte der Proteine wird mit ö^oiger Schwefelsäure versetzt. 

 Dann fügt man so lange von der Hopkins-Coleschen Mercurisulfatlösung 

 hinzu, bis der Zusatz von 1 Tropfen Bromwasser zur oben schwimmenden 

 Flüssigkeit keine Purpurreaktion mehr gibt. Nach 24stündigem Stehen wird 

 filtriert. Der Niederschlag wird in höchstens bis 2^0 Schwefelsäure ent- 

 haltendem Wasser aufgeschwemmt, durch Schwefelwasserstoff zersetzt, ab- 

 filtriert. Das Filtrat wird auf dem Wasserbade erwärmt, um den Schwefel- 

 wasserstoff zu vertreiben und auf ein genau bekanntes Gesamtvolumen 

 gebracht. 15 cm^ dieser Flüssigkeit werden in einer Eprouvette mit 2 cni^ 

 Amylalkohol versetzt. Unter tüchtigem Schütteln fügt man tropfenweise 

 Bromwasser hinzu bis zum \'erschwinden der Purpurfärbung des Amyl- 

 alkoholes. Für verschiedene Proben einer und derselben Tryptophanlösung 

 beträgt der Unterschied in der dazu nötigen Bromwassermenge höchstens 

 0"05 — 0"! cml In einem ali(iuoten Teile des nach dem Vertreiben de^ 

 Schwefelwasserstoffes erhaltenen Filtrates wird durch die Schwefelbestimmung 

 die in der Tryptophanlösung vorhandene Cystinmenge ermittelt. Man be- 

 rechnet, wieviel Bromwasser zum Sättigen des Cystins nötig ist und zieht 

 den so erhaltenen Wert von der bei der Titrierung der cystinhaltigen 

 Tryptophanlösung verbrauchten Bromwassermenge ab. Auf diese AVeise 

 erfährt man die Anzahl der Kubikzentimeter Bromwasser, welche nötig ist, 

 um das Tryptophan zu sättigen. Vor jeder Analyse ist es ratsam, das Brom- 



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•) F. Gowlarul Hopkins aud Si/dnei/ W. Coh\ A Contribntion to the Chemistry 

 of Proteids. Part I. A preliminary study of a hitherto undescribed product of tryptic 

 digestion. Jourii. of Physiol. Vol. 27. p. 418— 428 (1901). 



