\'cr(l:iiiuug : Mctliodcii zur UutcrHiichuiig der VordaiiungspnKlukte. 25H 



e) Isolierun;^ der Abbjuipiodnkte der Yerdauuni; d<'r Niikleoprotcid»'. 



Dir aus ciucni Eiweißanteil iiiul einer Niikloinsiiiirc hestelieiideii Nuklco- 

 proteide werden sowohl durch Pepsin als durch Trvpsin in die dei- proteolyti- 

 schen Einwirkung' dieser pjizyme unterworfenen Eiweiße und in Xuklein 

 gespalten. Letzteres wird dann wieder in Eiweilj und Nukleinsäure «gespalten. 

 Schlielilich wii-d die Nukleinsäure durch die Nukleaso in ihre einzelnen 

 Bestandteile zerlegt: Phosphorsäure, Nuklein- oder Pnrinhasen. Pyriniidin- 

 hasen usw. 



Die rntersuchun»' dei' die Spaltungsprodukte dvv Nukleoproteide ent- 

 haltenden Verdauungsgeniische erfolgt nach den in den Alischnitten über 

 den Ai)bau der Nukleinsäuren und die Isolierung der Abbauprodukte der 

 Proteine schon beschriebenen Verfahren. 



Falls Proteine im Verdauungsgemische vorhanden sind, so werden sie 

 zuerst durch vorsichtiges Erwärmen bei Essigsäurezusatz oder durch Aus- 

 fällung mit Alkohol in der Kälte niedergeschlagen. 



Im proteinfreien Filtrate wird dann die unzersetzte Nukleinsäui'e 

 gefällt. Ein Teil der Nukleinsäure scheidet sich schon bei der Neutralisation 

 der Verdauungsflüssigkeit und nachherigem vorsichtigen Eindaniiifen ab. 

 Im neutralisierten klaren Filtrate wird die noch vorhandene Nukleinsäure 

 durch verdünnte Schwefelsäure, durch Alkohol unter Zugabe von Natriuni- 

 acetat, durch Zusatz von gelöstem Kupfersulfat oder durch eine ö^/oige 

 wässerige Lösung von Mercuriacetat bei genau neutraler Reaktion gefällt. 



Um die durch Mercuriacetat gefällte, mit S])uren von Proteosen oder 

 vielleicht auch von Hexonbasen verunreinigte Nukleinsäure in reinerem 

 Zustande zu erhalten, wird dieser Niederschlag abfiltriert und auf dem 

 Filter mit etwas Wasser, dem etwas Mercuriacetat zugesetzt ist, gründlich 

 ausgewaschen. Dann wird der Niederschlag in Wasser aufgeschwemmt, das 

 C^uecksillier durch Schwefelwasserstoff abgeschieden, vom Schwefehiuecksilber 

 abfiltriert, auf dem Wasserbade eingeengt, schlielolich in al)solutes Alkohol- 

 äthergemisch gegossen, wobei eine feinflockige Fällung entsteht. Solange 

 der x\lkoholätlier noch wasserhaltig ist, geht immer ein Teil der Fidliing 

 wieder in Lösung, den man indes durch Einengen der Alkoholätherflüssig- 

 keit und erneutes Eingielöen derselben in absoluten Alkoholäther zurück- 

 gewinnen kann. 



Wird die derartig mit Quecksilberacetat vorbehandelte. niikleinsäure- 

 freie Verdauungslösung neutralisiert, so kann man darin die Proteo.sen und 

 die anderen Spaltungsprodukte des Proteinenanteiles des Nnkleoproteides 

 nach den früher beschriebenen Verfahren nachweisen und isolieren.') 



In der von der uiizersetzten Nukleinsäure befreiten Flüssigkeit kann 

 man die abgespaltene Phosphorsäure durch Eindampfen und Veraschen mit 

 Soda und Salpeter oder durch Versetzen mit Magnesiamischung und Be- 

 handlung des entstandenen Niederschlages von plios|)horsaurer Ammoniak- 



*) /'. Umber, Über die fermentativo Spaltung der Nukleoproteide im Stoftwoclisol. 

 Zeitsclir. f. klin. Med. Bd. 43. S. 282—303 (19U1). 



