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wegt. Vor Fäulnis schützt man sich durch Toluol. Sclilioßhch wird die 

 Inneuflüssigkeit des Dialysators mit absolutem Alkohol ausgefällt, der ent- 

 stehende Niederschlag mit Alkohol und Äther gewaschen und im Vakuum 

 über Schwefelsäure getrocknet. So erhielt Hafner aus 5 hj reiner Prelj- 

 hefe o"l g sehr wirksamen Invertins. 



Diese Methode der Invertindarstellung hat jedoch den ernsten Nach- 

 teil, daß die Präparate bei der Behandlung mit Ammoniak, namenthch aber 

 noch zum Schlüsse bei der Einwirkung des Alkohols unwirksam wurden. 

 Hafner meint, daß diese Empfindlichkeit der reinen Hefe mit ihrer Rein- 

 zucht in innerem Zusammenhange steht, jedenfalls hatte er bessere und 

 konstantere Erfolge beim Arbeiten mit untergäriger Bierhefe. 



Die frische Bierhefe wurde durch Sieben und Waschen mit Wasser 

 von 1 — 3" Temperatur von den Bestandteilen der vergorenen Bierwürze 

 gereinigt, hierauf durch Absaugen auf der Nutsche möglichst vom Wasser 

 befreit. Der Pvückstand wurde mit dem gleichen Gewichte 96VoigGn Alko- 

 hols Übergossen, damit zu einem gleichmäßigen Brei angerieben und dieser 

 24 Stunden sich selbst überlassen. Dann wird der Alkohol durch ein Flanell- 

 tuch abgeseiht, der Rückstand mit dem doppelten Gewicht Toluolwasser 

 angerührt und der Brei 2 — ?> Tage lang bei 2 — 5" dauernd gerührt. Nun 

 wird durch Faltenfilter filtriert, ev. noch durch spanische Erde geklärt. Die 

 klare Flüssigkeit wird bei 40" im Vakuum zum dünnen Sirup eingeengt, 

 der Sirup in ein Bechergias gegossen, mehrere Stunden im Kühlen stehen 

 gelassen und, nachdem sich noch anorganische Salze u. a. abgesetzt haben, 

 wieder filtriert. 



Nunmehr wird zu Portionen von 50 cm'^ etwas mehr als 50 cm^ ab- 

 soluten Alkohols langsam zugefügt. Sobald milchige Trübung sich gebildet 

 hat , werden schneU 300 cm'^ absoluten Alkohols zugetan. Man schwenkt 

 einmal um und läßt die Mischung ruhis- bis zum Absetzen von Flocken 

 stehen. Dann wird der noch milchige Alkohol abgegossen, der Niederschlag 

 nochmals mit 200 — 300 cm ^ absoluten Alkohols überschüttet. Zu ver- 

 meiden ist Rühren mit einem Glasstab, da sonst harzige Massen 

 entstehen, die nach dem Trocknen unwirksam sind. 



Das ausgeschiedene Rohinvertin wird noch 1 — 2mal mit kleinen Mengen 

 absohlten Alkohols übergössen: erst nachdem es durch mehrstündiges Stehen 

 hart geworden ist, auf Filter gebracht, mit Alkohol und wasserfreiem Äther 

 ausgewaschen und durch Absaugen getrocknet. Man wäscht aus und trocknet 

 am besten auf mehreren kleinen Filtern. Aus dem milchigen Alkohol er- 

 hält man noch eine Portion Rohinvertin. Schließlich wird das Präparat im 

 Vakuum über Schwefelsäure getrocknet. 



Die endgültige Reinigung erfolgte auch hier wie bei den Präparaten 

 aus der reinen Preßhefe durch Ammoniakausfällung und Dialyse. 



Ich füge nun einiges zur Erläuterung der Methode an. Da es lange 

 bekannt ist, daß das Invertin von der lebenden Hefe kaum abgegeben wird, 

 muß man die Zellen zunächst töten. Dazu dient die anfängliche Behand- 

 lung mit starkem Alkohol. Die Anwendung niedriger Temperaturen ist 



