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daß ihre Wirkung wegfällt oder erst bei tagelangem Gehen des Versuches 

 wieder zum Vorschein kommt. Man kann die Methode dadurch vereinfachen, 

 daß man das Organ auf Glasplatten trocknet und nun sofort wässerige 

 Auszüge des Trockenpulvers macht, ohne dasselbe weiter zu reinigen, (jibt 

 man nun Adenin und Guanin, wie beschrieben, zu und leitet Luft durch, 

 so geht die Desamidierung bereits in einigen Stunden vor sich. 



Eigenschaften der Purindesamidasen: Dieselben sind relativ 

 wenig empfindlich. Sie halten sich in Lösung wochenlang, in Pulver eben- 

 falls. Durch Erhitzen werden sie dagegen sofort zerstört. Sie dialysieren 

 nicht. Ihre Wirkung äußert sich gleich gut bei schwach saurer, neutraler 

 und schwach alkalischer Pteaktion. 



3. Xanthinoxydase. 



Nachweis des Ferments. M 



Derselbe geschieht durch die Umwandlung von Hypoxanthin in Xan- 

 thin und von Xanthin in Harnsäure. Ob l)eide I'mwandlungen durch ein 

 und dasselbe P'erment bewirkt werden, oder ob es sich auch hier um zwei 

 Fermente handelt, bedarf noch besonderer Untersuchung. Da die Organe, 

 welche Xanthinoxydase enthalten , auch die Purindesamidase in hochwirk- 

 samer Form besitzen, so kann man die Umwandlung der Aminopurine 

 direkt in Harnsäure erreichen. Bei der Auswahl der Organe muß man 

 jedoch berücksichtigen, daß in einzelnen neben der Xanthinoxydase auch 

 eine urikolytische Fermentation besteht und daß die letztere, indem sie die 

 frisch gebildete Harnsäure wieder zerstört, den Nachweis der ersteren er- 

 schweren kann. Sicher gehngt er stets in der Rindermilz, welche keine 

 urikolytische Fähigkeit hat. 



500 cm 3 Rindermilzextrakt werden mit O'b g in wenig Normalnatron- 

 lauge gelöster Purinbase (Adenin, Guanin, Xanthin oder Hypoxanthin) und 

 etwas Chloroform und Toluol versetzt; die Mischung wird auf eine kon- 

 stante Temperatur von 37" gebracht und nun Luft in kräftigem Strom 

 durchgeleitet. Nach wenigen Stunden ist der Versuch beendet und die zu- 

 gegebene Purinbase quantitativ als Harnsäure wiederzufinden. Man verfährt 

 dabei wie zur Isolierung der Purinbasen {S. 425), indem man zunächst ent- 

 eiweißt und dann die Kupfersulfat-Bisulfitmethode verwendet. Das salzsaure 

 Filtrat vom Schwefelkupfer wird auf dem Wasserbade auf ca. 10 cm^ ein- 

 geengt und dann noch 1 — 2 Stunden stehen gelassen. Die so gewonnene 

 kristallinische Harnsäure kann zur Sicherheit nach Horbaczewski 2) um- 

 kristaUisiert werden. Dabei verfährt man so, daß je 0"1 g Substanz in 2"0 cni^ 

 konzentrierter Schwefelsäure, eventuell unter ganz vorsichtigem schwachen 

 Erwärmen gelöst und dann mit dem vierfachen Volumen Wasser wieder 



^) .1. Schiffenhelm, Über die Fermente des Nukleinstoffwechsels. Zeitschr. f. phys. 

 Chemie. Bd. 57. S. 21 (1908). 



^) J. Horbaczeifski y Über die Trennung der Harnsäure von den Xanthinbasen. 

 Zeitschr. f. phys. Chem. Bd. 18. S. 341 ( 1894). 



