512 W. Palladin und S. Kostytschew. 



— 20°. ^) Der mit den Reagenzgläsern versetzte Eimer wird in einem 

 kalten Räume für 24 Stunden in aller Ruhe belassen. Nach Ablauf dieser 

 Zeit steigt die Temperatur der Mischung je nach den Temperaturverhält- 

 nissen des Raumes auf — 10" bis — 3". Für eine Abtötung der in der 

 Periode starker Lebenstätigkeit begriffenen Samenpflanzen genügt eine 

 Temperatur von — 20° bis — 25". Nabokich ^) wendete für die Erfrierung 

 der Pflanzen flüssige Kohlensäure an; letztere verflüchtigt sich aber sehr 

 schnell; für eine vollkommene Abtötung der Pflanzen ist jedoch nicht so 

 der Grad als die Dauer der Temperaturerniedrigung von Belang. Auch ist 

 es wichtig, daß die Reagenzgläser möglichst dicht gefüllt sind; eine Er- 

 frierung der Pflanzen in denselben Rezipienten, die alsdann für den Ver- 

 such selbst dienen sollen, ist zu vermeiden; ist dies jedoch unvermeidlich, 

 so muß man ein Thermometer in das Innere des Gefäßes einführen, da die 

 Temperatur der Kältemischung mit derjenigen der zu erfrierenden Pflanzen 

 nicht immer übereinstimmt. 



Für die Bestimmung der von den erfrorenen Pflanzen produzierten 

 Kohlensäure tut man das Versuchsmaterial in ein U-Rohr hinein und legt 

 in das vordere Ende des U-Rohres etwas mit 4 cm^ Toluol getränkte Watte. 

 Das die U-Röhre passierende Gas ist auf diese Weise mit Toluoldampf 

 gesättigt, wodurch eine Entwicklung der Bakterien verhindert wird. Toluol- 

 dampf hat keinen Einfluß auf den Titer des zur Absorption der Kohlen- 

 säure bestimmten Barytwassers. 



Die Vorzüge der soeben beschriebenen Erfriermethode bestehen im 

 folgenden: 



1. Die durch Erfrierung getöteten Pflanzen produzieren bedeutend größere 

 COa-Mengen als die aus denselben Pflanzen bereiteten Preßsäfte oder Aceton- 

 dauerpräparate ; am wenigsten sind für Samenpflanzen Acetonpräparate geeignet. 



2. Die erfrorenen Pflanzen werden in unversehrtem Zustande in die 

 Rezipienten hineingetan. Palladin wies nach, daß durch postmortale Zerstörung 

 der Zellstruktur der Pflanzen die Tätigkeit der Enzyme herabgesetzt wird. 

 Noch schädlicher muß freilich eine Zerkleinerung der lebenden Pflanzen wirken. 



3. Durch Anwendung der Erfriermethode wird ein Arbeiten in Gas- 

 medien ermöglicht. Die in Wasser versenkten erfrorenen Pflanzen scheiden 

 bedeutend geringere CGo-Mengen aus als die in Gasmedien befindlichen. 



Die Kohlensäureproduktion der erfrorenen Pflanzen ist ein enzyma- 

 tischer Prozeß; dafür spricht unter anderem die Tatsache, daß die Kohlen- 

 säureproduktion erfrorener Pflanzen meistens von Alkoholbildung begleitet 

 ist. Brenstein^) und nachher Nabokich*) beobachteten eine Kohlensäure- 



*) Zur Kontrollierung der Temperatur steckt man in den Kautschukstopfen des 

 Reagenzglases ein Thermometer; die Kugel des Thermometers muß mit den zu erfrie- 

 renden Pflanzen in unmittelbarer Berührung stehen. 



^) Nabokich, Über die Aussclieidung von Kohlensäure aus toten Pflanzenteilen. 

 Ber. d. Deutschen botan. Gesellsch. Bd. 26ar S. 324 (1908). 



*) Brenstein, Über die Produktion von Kohlensäure durch getötete Pflanzenteile. 

 Dissert. Kiel 1887. 



*) Nabokich, 1. c. 



