Die Kapillarisation zur Unterstützuug mikrochemischer Arbeiten. 247 



protoplasmatische Körnchen gebunden sich vorfindet. Die Färbung der 

 Gefäße, der Schutzscheide und der braunen Härchen, mit denen die Haut 

 bedeckt ist, kann auf die Wirkung dieser Oxydase zurückgeführt werden. 



Das Enzym wirkt am besten in alkalischer Lösung. Man bereitet daher 

 die Versuchslösung, indem man die zerschnittenen Endknospen der jungen 

 Triebe mit einer verdünnten ^S^atronlauge (O'P/o) zerreibt und auslaugt. 



An der Luft, nicht aber unter Wasserstoff wird dieser alkaUsche 

 Extrakt bald braun. Einmaliges kurzes Aufkochen zerstört, wie es scheint, 

 diese Oxydase nicht ganz, denn nach längerer Zeit bemerkt man gleich- 

 falls an der Luft die Verfärbung. 



Zunächst suchen wir in dem einfachen (nicht alkalisch gemachten) 

 Preßsaft das Enzym zu bestimmen. Man bringt einige Tropfen des unter 

 Druck filtrierten, mit Thymolwasser verdünnten Preßsaftes auf den Kapilla- 

 risator und behandelt das Feld mit Guajak -f- Ho 0., : es wird blau mit 

 einer stärker gefärbten Mittelfläche, umgeben von einer weißen Zone, die 

 von einer intensiv blauen Ptandlinie begrenzt wird. Diese ungefärbte, weiß- 

 bleibende Randzone enthält eine Antioxydase: denn untersucht man ein 

 Kapillarisationsfeld mit Ursoltartratlösung -t- Ho Oo , so erhält man eine 

 weiße Kreisfläche mit schwach dunkler, schieferfarbiger Randlinie, während 

 außerhalb derselben die gelbbraune Färbung der Autoxydation erscheint. 



\'erwendet man zur Kapillarisation einen an der Luft dunkel ge- 

 wordenen Extrakt, so ist nicht schwer zu sehen, daß der braune Farbstoff 

 gleichfalls bis in die äußerste Randlinie vorgerückt ist. woraus man schließen 

 kann, daß sich die Oxydase durch Autoxydation selbst verfärbt oder aber, 

 daß sich Oxydase und l'arbstoff in einer Bindung vorfinden, die durch 

 eine einfache Kapillarisation nicht getrennt werden kann. 



Der anatomische Befund paßt für beide Schlußfolgerungen; denn z. B. 

 die Gefäßwandungen sind braun gefärbt und enthalten gleichzeitig das 

 oxydierende Enzym, ebenso die Schutzscheide: man legt zum Nachweis 

 die betreffenden Schnitte auf Filtrierpapier, welches mit schwach alkalisch 

 gemachter Violaminlösung i) getränkt worden war. 



Das Leptoni der Gefäßbündel bleibt bei der Einwirkung des Sauer- 

 stoffs ungefärbt, und die violette Färbung schwindet hier, während sie im 

 Gefäßteil meist erhalten bleibt und intensiver wird; es ist also im Leptom 

 eine Antioxydase mit reduzierenden Eigenschaften vorhanden. 



Um die Frage zu entscheiden, bringen wir den schwach alkalisch 

 gemachten Pflanzeuextrakt , der mehrere Stunden an der Luft gestanden 

 hat und braun geworden ist, auf den Kapillarisator und das sich bildende 

 Feld, bevor es seine endgültige Ausdehnung erlangt hat, in Essigsäure- 

 dampf. Dadurch tritt eine Fähung des Farbstoffes ein, und die oxydierenden 

 Enzyme kapillarisieren über die Farbstoffgrenze hinaus. 



Nachdem die Bewegung zu Ende gekommen ist, muß man mit gas- 

 förmigem Ammoniak die Essigsäure fortnehmen und kann dann mit den 

 entsprechenden Reagentien Oxydase resp. Peroxydase leicht nachweisen. 



'J Tetramethylparaphenylendiaminchlorid. 



