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Es gelingt tVrncr, aus dem Extrakt mit Tierkohle den Farbstoff 

 gänzlich herauszunehmen . wodurch eine völlig farblose Lösung hergestellt 

 wird, in der mit <iuajak und Wasserstoffsuperoxyd eine wenn auch schwache 

 Bläuung eintritt. 



Teilweise gehen die Enzyme in die Kohle ül)er. und aus derselben 

 lassen sie sich gleichzeitig mit dem Farbstoff durch verdünnte Natron- 

 lauge wieder ausziehen. 



Wird dieser Extrakt im Wasserring kapillarisiert, so läßt sich ein 

 Feld erhalten, in welchem das oxydierende Enzym aufgefunden werden 

 kann. Das Chromogramm zeigt nun im Vergleich zu dem vorhergehenden 

 mehr Farbstoff und weniger Enzym an. Daraus folgt, daß die Essigsäure 

 nicht etwa spaltend auf eine chemische \'erbindung, auf eine < )xydase. 

 einwirkt. Das F.nzym ist in diesem Falle mit seinem Substrat durch Ad- 

 sorption so verbunden, daß beide durch einfache Kapillarisation nicht ge- 

 trennt werden können. 



Die Teimung gelingt schließlich durch wiederholte feuchte Kai)illari- 

 sation; doch ist dieses Verfahren immerhin umständlich. 



Mikroskopische Schnitte geben mit der \'iolamin- resp. mit der 

 Guajakwasserstoffsuperoxydreaktion nicht immer das gleiche Bild. Das ge- 

 bildete \'iolett resp. Blau wird teilweise wieder reduziert und dadurch miß- 

 farbig. Diese ^'eränderung kann auch au dem braunen Farbstoff selbst 

 beobachtet werden: sie hängt ab von dem \'orherrschen des oxydierenden 

 Enzyms oder der erwähnten Antioxydase. 



Daß die im Gewebe vorhandenen Farbstoffe dieser Veränderung leicht 

 unterliegen, kann auf folgende Weise demonstriert werden: Läßt man den 

 alkalischen Pflanzenextrakt teilweise unter Wasserstoff und an der Luft 

 stehen, so wird intermediär ein roter Farbstoff geliildet. welchen man 

 kapillaranalytisch leicht von dem braunen trennen kann. 



Fällt man dieses Farbstoffgemisch mit Essigsäure und löst den aus- 

 gewaschenen Niederschlag wieder mit Kalilauge auf, so erhält man eine 

 rotbraune Lösung, in der man durch iSauerstoff in stat. nasc. — z. B. durch 

 Ha 0-2 + Ba 0, — die Farbstoffe völlig oxydieren und in eine gelb gefärbte 

 Verbindujig überführen kann. Durch AVasserstoff in stat. nasc. werden die 

 dunklen FarI)stoffe gänzlich in die Leukoverbindung verwandelt : zu dieser 

 \ erwandlung kann man Natriumamalgam verwenden. 



Das Chromogramm mit den diese Umwandlungen l)ewirkenden En- 

 zymen läßt sich auch so herstellen, daß die violette Oxydasefärbung die 

 Mitte einnimmt, welche dann von einer hellen Entfärbungszone umringt 

 ist; die Grenzlinie wird von den Farbstoffen gebildet. Diese Darstellung 

 beruht darauf, daß man die X'ersuchslösung fortgesetzt und mit Unter- 

 brechungen auf die Mitte aufträufeln, und wenn das Feld genügend an- 

 gereichert ist. Wassertropfen nachfolgen lädt, wodurch hauptsächlich Anti- 

 oxydase nach außen gespült wird, während die üxydase mehr zuiückbleibt. 



