Ergänzungen zu den Methoden zur Untersucliung der Vordnuuiigsprodukte. 41)7 



Wärmt. Nach Erkalten der schwarzbraunen Flüssigkeit wird sie von der 

 Salzsäure befreit, entweder durch Neutralisation mittelst Natronlauge oder 

 durch vorsichtiges Abdampfen auf dem Wasserbade und nachherige Ilinzu- 

 fügungvon zum Sieden gekochten destillierten Wassers, um 20 m» Gesamt- 

 volumen zu erreichen. Man filtriert vom etwaigen Niederschlage ab und 

 entfärbt das dunkelbraune Filtrat mit Silbernitrat bei Salzsäui-eanwesen- 

 heit nach Sörensen und Jessen-Hansen auf die fi'üher beschriebene Wnse 

 (Bd. III. S. 229). Das so erhaltene klare Filtrat dient zur I'.estimmung auf 

 die oben angegebene Art des Ammoniakstickstoffes und darauf des Amino- 

 säurenstickstoffes. 



Zieht man vom Aminosäurenstickstoffe nach Behandlung der \ei-- 

 dauungsflüssigkeit mit Salzsäure den Aminostickstoff derselben Flüssigkeit 

 vor dieser Behandlung ab, so erhält man den eigentlichen Peptidstickstoff. 

 Der Unterschied zwischen dem Ammoniakstickstoffe der \'erdauungs- 

 flüssigkeit nach und vor Behandlung mit Salzsäure gibt den Amid Stick- 

 stoff, welcher eigentlich nur eine besondere Art von Peptidstickstoff dar- 

 stellt. Gleichzeitig mit dem Abbau der Proteine erfolgt nämlich nach 

 Henr'iques und Gjaldhäk eine sekundäre Spaltung der gebildeten Amino- 

 säuren, bei welcher nun Ammoniak abgespalten wird. Dui'ch Zusatz des 

 Amidstickstoffes zum eigenthchen Peptidstickstoffe erhält man den ge- 

 samten Peptidstickstoff. Die so erzielte Zahl ist indes nach Hmriqiies und 

 Gjaldhäk nicht stets völlig richtig, da der Zeitpunkt des vollständigen 

 Proteinenabbaues sich nicht immer mit absoluter Sicherheit angei)en läßt. 



Falls die Verdauungsflüssigkeit Hippursäure enthält, so nmlJ man 

 sie mehrmals mit Essigester schütteln, um sie davon zu befreien ehe man 

 den Peptidstickstoff der Verdauungsflüssigkeit bestimmt. 



Unter dem Namen von Peptidstickstoff versteht man den Stickstoff, 

 welcher als Peptidgruppe — CO.NH — noch vorhanden ist. Das \'erhältnis 

 zwischen diesem Peptidstickstoffe und dem bei der hydrolytischen Spaltung 

 der Peptidradikale in Carboxylgruppen und Aminogruppen freigewordenen 

 Aminosäurenstickstoffe erlaubt eine annähernde Schätzung des Verdauungs- 

 grades der Proteine. 



Henriques und Sörensen führen die Formoltitrierung in Stadien in 

 folgender Weise aus: Man neutralisiert die \'erdauungsflüssigkeit gegen 

 Lackmuspapier und fügt nachher Phenolphtalein und \'.-, normale Natron- 

 lauge hinzu bis zur schwach roten Farbe ( l-tes Stadium). Darauf wird 

 wieder Vs normale Natronlauge zugesetzt bis zur stark roten Farbe (2-tes 

 Stadium). Nun wird neutrale Formollösung hinzugefügt, wodurch die rote 

 Farbe verschwindet; es wird wieder Vs normale Natronlauge zugesetzt 

 bis zur schwach roten Farbe (3-tes Stadium) und nachher bis zur stark 

 roten Farbe (4-tes Stadium). In allen Fällen, wo sich bei der Hydrolyse 

 der Proteine eine große Menge freier Aminosäuren bildet, ist nach Hrnrujues 

 und Gjaldhäk das Verhältnis zwischen dem 1-ten und dem 4-ten Stadium 

 weit. Wenn sich aber bei der Hydrolyse statt freier Aminosäuren haupt- 

 sächlich Polypeptide bilden, ist dieses Verhältnis hingegen eng. 



Abderhalden, Handbuch der biochemischen Arbeitsmethoden. VI. 32 



