526 Alexis Cariel. 



Platte und säuert mittelst eiiuT Tipettc die Flüssigkeit von dem Boden 

 der (Jhisschale auf. I»ie Kultur wird in kleine Fraijniente zerschnitten. 

 die mit der Flüssiiikeit in ein Itöhrcben j^ebraeht werden. Naeh eifolgtem 

 /entrifuiiieren erliält man so viel Flüssigkeit, daß man verschiedene der Pro- 

 dukte, die auljerhalh des ( )rganismus entstehen und leben, untersuchen kann. 



Die obige Technik erlaubt, ausgedehnte Kulturen untei' ziemlich 

 "•ünstiiren PJedinaungen anzulegen. Sie ist aber bei weitem noch nieht 

 vollkommen. Zweifellos wird sie später noch verbessert werden können. 



J\'. Auf (irund der ausgearbeiteten Methoden ist es nun gelungen, 

 gewisse Funktionen der aul,)erhalb des Organismus lebenden (iewebe zu 

 studieren. 



1. Um festzustellen, ob die in vitro kultivierten Gewebe die Eigen- 

 schaft behalten, gegen ein Antigen durch Erzeugung eines Antikörpers zu 

 reagieren, versuchte ich unter Mitarbeit von Herrn Bagnrahl Jm/ebrigtsen, 

 Knochenmark und Lymphdrüse von Meerschweinchen gegenüber den roten 

 Blutkörperchen der Ziege hämolytisch zu machen. Mit Hilfe der Bat- 

 schläge, die uns für diese Ver.suche Herr Hicleyo Xoguchi freundhchst ge- 

 geben hat. lial)en wir hierbei sogleich positive Besultate erhalten. 



Knochenmark und Fragmente von Lymphknoten vom Meerschweinchen 

 wurden in Plasma vom Meerschweinchen in 0(tb}-itscJiewd-i-Scha\en kultiviert. 

 Wir wählten als Antigen Ziegenblut, weil es von dem Meerschweinchen- 

 plasma nicht oder sehr wenig hämolysiert wird. Im allgemeinen wurden 

 einer Kultur, die 20 Tropfen Plasma enthielt, 5—6 Tropfen Ithigersaher 

 Lösung zugefügt . welche die Gewebsfragmente suspendiert enthielt. Zur 

 gleichen Zeit bereiteten wir mit Ziegenblut eine Kontrollkultur ohne An- 

 tigen : ferner wurden auch Kontrollkulturen hergestellt, die nur aus Meer- 

 schweinchenplasma und Ziegenblut bestanden oder solche aus Meerschwein- 

 chenplasma. Ziegenblut und durch P^i'hitzen abgetötetes Knochenmai-k. Die 

 GahrifscJieicski-SvhnU'U wurden dann in einem Brutschrank bei ;)9" auf- 

 bewahrt. Nach einigen Stunden waren die (iewebsfragmente mit Zellen 

 umgeben , welche bald in den Nährboden eindrangen. Am zweiten Tage 

 war noch keine Beeinflussung der roten Blutkörperchen der Ziege zu be- 

 merken, jedoch war am dritten Tage bereits leldiafte Phagozytose einge- 

 treten. Am 4. oder 5. Tage wurden die Glasschalen geöffnet. Die gallert- 

 artige Plasmamasse wurde zu kleinen Stückchen zerschnitten und dann 

 mit einer Pipette die am Boden der Schale befindliche Flüssigkeit aufge- 

 saugt. Die Flüssigkeit und das Plasma, welche die (Jewebe enthielten, wur- 

 den in ein Böhrchen gei)racht. Wir lieljen gefrieren . brachten dann auf 

 gewöhnliche Temperatur zurück und zentrifugierten. Die hämolytische Wir- 

 kung der Flüssigkeit wurde zunächst mittelst der I'Jpsteinsi-hQn und Otten- 

 /«rr/schen Methode geprüft. Die F^igenschaften der Hämolysine wurden 

 mit den gewöhnlichen Methoden studiert. 



Wir fanden, daß der Flüssigkeitsextrakt der Kultuien. die das Ziegen- 

 blut enthielten, rote Blutkörperchen der Ziege stark hämolysierte, widireml 

 die Flüssigkeit der Kontrollkulturen inaktiv war. Es steht also fest, daß 



