Mikroskopische Technik. j;-«! 



Fettfiirbun^en werden von Alters her mittelst der Osmiinn säure 

 vorgenommen, so z. 15. mit den schon erwähnten Gemischen nach Flrmmhui 

 oder Marchi. Die Wirkung beruht auf einer Reduktion des Osmiumtetra- 

 ■oxyds (Os O4) zu Osminmoxyd (Os 0,), doch tritt die lieaktion rein nur 

 bei Olein und Ölsäure auf, Palmitin und Stearinsäure schwärzen sich aber 

 häufig bei Nachbehandlung mit Alkohol auch noch ..sekundär" infolge der 

 Umwandlung von Os 0, in Os (0H)4. Da Xylol bei der Par.-ütincinbottnng 

 auch Osmium säuregefärbtes Fett noch auszieht, ist es besser, Chloroform 

 oder Schwefelkohlenstoff zu verwenden. Besser ist es aber noch, Gefrier- 

 mikrotomschnitte anzufertigen und diese in Glyzerin-Gelatine oder even- 

 tuell nach ganz kurzem Entwässern in absolutem Alkohol imd Aufhellen in 

 Benzol in geschmolzenen reinen Kanadabalsam einzuschließen. Am besten 

 osmiert man doppelt, und zwar indem man in Flemmin(^i^c\\m\ (iemisch 

 fixierte Stücke nach dem Schneiden auf dem Gefriermikrotom in wässeriger 

 Osmiumsäurelösung 24 Stunden im Dunkeln nachfärbt, gründlich auswässert, 

 eventuell die Kerne mit Safranin rot färbt, zur ..sekundären- Schwärzung 

 (siehe oben) 6—12 Stunden in absoluten Alkohol legt und nun wie oben 

 weiter behandelt. 



Allein die Osmiumsäure ist trotz alledem unzuverlässig, da sie auch 

 Dinge, welche keine Fette sind, so Gerbsäure, schwärzt und auf der an- 

 deren Seite nicht alles Fett darstellt. Sie ist infolgedessen gegenüber den 

 viel einfacher zu handhabenden und sicheren Fettfärbungen mit Azofarb- 

 st offen größtenteils verlassen worden. Als solche Azofarbstoffe kommen 

 das Sudan III und das 2 CHj-Gruppen mehr enthaltende Scharlach R 

 (Fettponceau) zur ^'erwendung. Nach Formolhärtung werden Gefrierschnitte 

 in konzentrierte Lösung des einen oder anderen dieser Farbstoffe (von 

 denen ich Scharlach R vorziehe) in TOVoigem Alkohol auf etwa 20 Mi- 

 nuten eingelegt und nach Durchziehen durch TOVoig^n Alkohol in Wasser 

 gebracht. Man kann dann die Kerne mit Hämatoxylin leicht anfärben 

 wieder in Wasser (eventuell zur Blaufärbung der Kerne mit Zusatz 

 von etwas Ammoniak) bringen und die Schnitte aus diesem aufziehen und 

 in Glyzerinleim einschießen. Da diese Lösungen des Sudan III und des 

 Scharlach R aber nicht sehr kräftig färben, da sie nicht hochgradig kon- 

 zentriert sind, kann man entweder in kochendem Alkohol den Fariistoff 

 lösen und die Lösung bei 37 Grad aufbewahren und auch bei dieser Tem- 

 peratur färben (nach B. Fischer) oder aber eine der beiden folgenden weit 

 stärkeren von mir angegebenen Lösungen verwendi'U. Das Verfahren ist 

 dann wie oben beschrieben, nur muß man die Schnitte aus TOVoi?^''» Al- 

 kohol in die sehr konzentrierte P'arblösung übertragen: man Itraucht dann 

 in dieser nur wenige Minuten zu färben, spült kurz in T()«/oigem .\1- 

 kohol ab und bringt di« Schnitte dann in Wasser. \'on den beiden I'arl>- 

 lösungen ziehe ich die zweite vor um! verwende sie täglich. 



Alkohol abs 70 cin^, 



Wasser 10 cm \ 



lO^/oige Natronlauge . . 20 cw\ 



