Mikroskopische Technik. ^Qr^ 



Für die Knocheiilakunen und ihre Ausläufer l.cniitzti' man 

 früher Schliffe unentkalkten Knochens, welche man in Alannlüsunji einh'frte, 

 wobei frei werdende Kohlensäure in die Lakunen und Kanälchen rindrin^'t 

 (nach V. Recliinghausen). Jetzt stehen zwei vorzügliche Methoden von 

 Sclimorl zur Verfügung. Die erste dieser, welche sicherer zu sein scheint. 

 .soll hier wiedergegeben werden. 



Schniorlsche Methode. 



Man fixiert kleine Knochenstückchen am besten in Formol. härtet 

 6 — 8 Wochen in J//c7/erscher Flüssigkeit nach, wäscht 24 Stunden in 

 Wasser ab, entkalkt, am besten mittelst E/men^chei- alkoholischer Salzsäure- 

 lösung (dann ist das vorherige Wässern überflüssig), härtet nach soi'g- 

 fältigem Wässern in steigendem Alkohol nach und bettet ein oder stellt 

 Gefrierschnitte her. Dünne Schnitte werden mindestens 10 Minuten in 

 Wasser eingelegt und dann am besten in folgender ammoniakalischer 

 Thioninlösung gefärbt : 



Konzentrierte Lösung von Thionin 



in öOVuigem Alkohol 1 cm^, 



Aqua dest 10 ,. , 



Liquor ammonii caust 2 Tropfen. 



Die Schnitte werden sodann gewässert, 1 — 2 Minuten in Alkohol 

 übertragen, wieder gewässert und gelangen mit Glasnadeln für einige Se- 

 kunden oder länger in gesättigte wässerige Lösung von I'hosphorwolfram- 

 säure. Sodann werden die Schnitte mindestens ö — 10 Minuten, bis sie einen 

 himmelblauen Ton haben, gewässert und die Färbung in 20" oi?^'» Forniol 

 1 — 2 Stunden oder in Liquor ammonii caust. 10 cin\ Was.ser 100 rw'. 5 Mi- 

 nuten fixiert. Sodann werden die Schnitte in einmal zu wechselnden 9<)" oigen 

 Alkohol übertragen, dann zur Entwässerung in Oö" oige'^ ^'^^^'i' absoluten 

 Alkohol, zur Aufhellung in Xylol oder Karbolxylol (kurz) und in Balsam 

 eingeschlossen. Ist die Grundsubstanz zu dunkel gefärbt, so kann man 

 nach der Fixierung etwa 3 — 5 Minuten in Salzsäurealkohol differenzieren, 

 eventuell kann man dann zellige Elemente noch mit Hämatoxylin nach- 

 färben. 



Bei dieser Methode sind Knochenhöhlen und ihre Ausläufer blau- 

 schwarz, Zellen, besonders Kerne, blau gefärbt. Die Grundsubstanz ist bei 

 Fixierung der Färbung in Formol hellblau, bei Fixierung in Ammoniak 

 farblos bis grünblau, bei letzerer, wenn in il/iV/Ze^-scher Flüs.sigkeit gehärtet 

 worden war, rot dargestellt. Färbt man statt mit der obigen Farblösung nach 

 Entkalkung in wässeriger Salpetersäure 1/4— V» Stunde in konzcntricrti'r 

 wässeriger Thioninlösung, welche zur Hälfte mit Wasser verdünnt wird 

 und überträgt die Schnitte nach der Phosphorwi.lframsäurebehandlnng in 

 fließendes Wasser auf 2 Stunden oder länger und sodann 1 1' Stunden 

 in 50/oige Lösung von Kalialaun in A(|ua dest., wässert dann. entwäs.siTt 



Abdorhalden, Handbuch der biochemischen Arbeitsmethoden. VII. 4.> 



