650 



38. Vorlesung. 



Bestandteile 



und 



chemische 



Zfusamvien- 



setzung. 



schaffenheit des Nährbodens ab, auf dem die Diphtheriebazillen gezüchtet werden. 

 Besonders geeignet für diesen Zweck ist eine Rindfleischbouillon, die Ob^/o Kochsalz 

 und 27o Pepton Chapoteaut enthält. Sauere Reaktion des Mediums ist für die Toxiu- 

 produktion schädlich, man muß daher die Säurebildiing, die durch das Wachstum 

 der Bazillen in der ersten Zeit eintritt, nach Möglichkeit vermeiden. Spronck sieht 

 als eine wichtige Quelle der Sänrebildung den Muskelzucker des zur Bouillonbereitung 

 verwendeten Fleisches an und bat daher empfohlen, das Fleisch vor der Verwendung 

 erst so lange lagern zu lassen, bis der Muskelzucker durch den Fäulnisprozeß bzw. 

 durch Gärungsvorgänge zerstört ist. Th. Smith erreichte ein zuckerfreies Medium durch 

 2tägiges Vergären der Bouillon mit Bact. coli, Martin durch Vergärung mit Hefe. 

 Nach Buete ist es empfehlenswert, der Kulturflüssigkeit kleine Marmorstücke zu- 

 zusetzen, welche die Säure binden. Andrerseits schädigt aber auch eine zu starke 

 Alkalibildung die Toxinproduktion. Die Kulturen sind in Kolben anzusetzen, in denen 

 ihnen ein genügendes Oberflächenwachstum ermöglicht wird, weil hinreichender 

 Luftzutritt hier eine Vorbedingung ist. Als Züchtungstemperatur eignet sich am 

 besten eine solche zwischen 33 und 35" C, weil das bereits gebildete Gift bei höheren 

 Temperaturen schon wieder geschwächt wird. Der Zeitpunkt, wann die Kulturen 

 den höchsten Giftgehalt erreichen, ist nicht nur von der Beschaffenheit des Nähr- 

 bodens und der Art der Züchtung in hohem Grade abhängig, sondern auch nach 

 den besonderen Eigentümlichkeiten der verwendeten Stämme sehr verschieden. Unter 

 günstigen Umständen ist das Maximum der Toxizität schon nach 4 — 7 Tagen erreicht, 

 in anderen Fällen dagegen erst nach 2—3 Wochen. 



Das Diphtheriegift wird so hergestellt, daß die 2 — 4 Wochen lang bebrüteten 

 Bouillonkulturen zunächst mehrmals durch sterile doppelte Papierfilter filtriert und 

 dann mit Toluol versetzt werden. Bei täglich zu wiederholendem gründlichem 

 Durchschütteln läßt man die Kolben 3 — 4 Tage lang bei Zimmertemperatur stehen. 

 Die Diphtheriebazillen, die hierdurch abgetötet werden, sinken zu Boden, und die 

 gifthaltige Bouillon wird völlig klar. Sie wird durch Bedeckung mit einer 1 — 2 ccm 

 hohen Toluolschicht steril erhalten und unter Lichtabscbluß aufbewahrt. 



Nicht jede Kultur ist zur Giftbildung gleich gut geeignet. Nur durch Aus- 

 wahl aus möglichst zahlreichen, frisch aus dem Menschen gezüchteten Kulturen 

 läßt sich ein Diphtheriestamm ermitteln, der besonders starke Gifte bildet. Die 

 Gewinnung einer stark toxischen Diphtheriebouillonkultur ist eine nicht immer leichte 

 Aufgabe, weil selbst die stark giftbildenden Diphtheriestämme zeitweise sehr erheb- 

 liche Schwankungen im Giftbildungsvermögen aufweisen, ohne daß es stets gelänge, 

 die Ursache dieser Variabilität aufzudecken. Mit der Virulenz der einzelnen Stämme 

 geht die Giftbildung keineswegs parallel. 



Durch die grundlegenden Untersuchungen Ehrliche wissen wir, daß 

 das Diphtheriegift nicht ein einheitliches Gilt ist, sondern von vornherein 

 zwei in ihren biologischen Funktionen durchaus verschiedene Bestandteile 

 enthält, das Toxin (im engeren Sinne) und das Toxon. Ehrlich kenn- 

 zeichnet die verschiedene Giftwirkung beider Substanzen folgendermaßen : 

 „Während das Diphtherie toxin in der Weise wirkt, daß die Tiere 

 unter den Erscheinungen von Hydrothorax, Aszites, Nebennierenrötung 

 und Nekrosen der Haut zugrunde gehen, tötet im Gegensatze dazu das 

 Toxon auch in hohen Dosen nie akut. Die entzündungserregenden 

 Eigenschaften können bei kleinen Dosen ganz fehlen und sind bei 

 mittleren nur in sehr abgeschwächtem Maße vorhanden. Die Ödeme 

 schwinden im Laufe von mehreren Tagen vollständig, Nekrosen bleiben 

 aus, und Haarausfall ist höchstens in einer partiellen Enthaarung zu 

 beobachten. Charakteristisch sind dagegen die Lähmungserscheinungen, 

 die je nach der Dosis zwischen dem 14. und 28. Tage, gewöhnlich 

 aber in der 3. Woche eintreten. Oft fehlt bei den Tieren jede Spur 

 lokaler Reaktion, und sie behalten ihr Körpergewicht bei, bis sie 

 plötzlich von Lähmungen befallen werden, denen sie in wenigen Tagen 

 erliegen können." 



Über die chemische Zusammensetzung des Diphtheriegiftes 

 wissen wir nur wenig. Es ist bis jetzt noch nicht gelungen, es rein 



