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49. Vorlesung. 



B. 



Bestimmung der völlig lösenden Dosis nach vorherigem Zusammen- 

 wirken von Extrakt und Komplement unter Verw endung sensibili- 

 sierten Blutes. 



HämolytiBcher Ambozeptor 



Harnmelblat- 

 körperchen 



0-5 



0-25 



0-5 



0'3 



0-2 



015 



Ol 



1:100 [1 

 1:100 [1 

 1:300 [1 

 1:300 [1 

 1:300 [1 

 1:300 [1 

 1:300 [1 



Obccm 1:20 



Nach V4Stündigem Verweilen im 

 Bmtschrank wird je l'bccm einer 

 gleichfalls zuvor ä ^ Stunden im 

 Brutschrank gehaltenen Mischung 

 von gleichen Teilen Extraktver- 

 dünnung, physiologischer Koch 

 Salzlösung undlOfach veidünntem 

 Meerschweinchenserum zugefügt. 



Die fertig beschickten Röhrchen werden 1 Stunde im Brutschrank oder 

 ^/j Stunde im Wasserbade bei 37° gehalten. Danach wird im Vorversuch A die 

 kleinste lösende Dosis („Titerdosis") des Ambozeptors bestimmt durch Feststellung 

 desjenigen Röhrchens von 1 bis 9, in dem gerade noch völlige Lösung der Blut- 

 körperchen eingetreten ist. 



Die Blutkörperchen dürfen bei alleinigem Komplementzusatze keine Lösung 

 zeigen. Demgemäß muß in dem Röhrchen 9 die oberhalb der Blutkörperchen 

 stehende Flüssigkeit farblos bleiben. 



Aus dem Vorversuche B (Röhrchen 10 bis 16) ergibt sich die völlig lösende 

 Ambozeptordosis bei vorheriger Einwirkung des Extrakts auf das Komplement. Sie 

 ist durch die antikomplementäre Extraktwirkung bzw. durch Abschwächung des 

 verdünnten Komplements größer als bei der einfachen Bestimmung des Ambozeptor- 

 titers. Es muß daher einerseits mindestens die im Vorversuche B völlig lösende 

 Ambozeptormenge, andererseits mindestens das 4fache der in Reihe A ermittelten 

 Titerdosis "für den Hauptversuch angewandt werden. 



Enthält z. B. im Vorversuch A Röhrchen 3 die kleinste völlig lösende Dosis, 

 im Vorversuche B Röhrchen 13, so ergibt sich als Gebrauchsdosis O'b ccm der 

 500 fachen Ambozeptorverdünnung. 



Enthält aber z. B. im Vorversuch A Röhrchen 3 die völlig lösende Dosis, 

 im Vorversuch B aber Röhrchen 11, so ergibt sich als Gebrauchsdosis für den 

 Hauptversuch 05 ccm einer Ambozeptorverdünnung von 1 : 200. 



Enthält endlich z. B. im Vorversuch A Röhrchen 3 die völlig lösende Dosis, 

 im Vorversuch B aber Röhrchen 15, so ergibt sich als Gebrauchsdosis 05 ccm der 

 Ambozeptorverdünnung 1 : 500. 



Zugleich sind die beiden Vorversuche A und B in gleicher Weise anzusetzen, 

 nur mit dem Unterschiede, daß das Komplement anstatt in lOfacher in 20facher 

 Verdünnung zur Anwendung gelangt. Dabei ist in dem Versuchsteil B derjenige 

 Extrakt zu verwenden, der auch im Hauptversuche bei 20facher Komplement- 

 verdünnung benutzt wird. 



Die Gebrauchsdosis ergibt sich auch in diesem Falle aus den oben erörterten 

 Regeln. 1) 



7. Um eine Gewähr dafür zu haben, daß im Hauptversuch einerseits eine 

 hinreichende Komplementmenge vorhanden ist, andererseits ein Komplementüber- 

 scHuß vermieden wird, empfiehlt es sich, unter Verwendung der nach dem Ver- 

 fahren in Ziffer 6 bestimmmten Gebrauchsdosen des Ambozeptors den Grad der 

 Komplementwirkung quantitativ auszuwerten. 



') Wenn ausnahmsweise im Vorversuche B unter Verwendung 20facher 

 Komplementverdünnung auch bei der größten Ambozeptormenge in Röhrchen 10 

 keine völlige Lösung eintritt, kann trotzdem der Hauptversuch mit der größten 

 Ambozeptormenge des Vorversuchs B ausgeführt werden. Tritt in derartigen Aus- 

 nahmefällen in den Kontrollröhrchen nicht vollständige Hämolyse ein, so ist bei 

 sich ergebenden Zweifeln die Untersuchung mit demselben Serum zu wiederholen. 



