Aliphatische Aminosäuren. 399 



unter vermindertem Druck abgedampft oder mit Wasserdampf abgeblasen werden, oder 

 man fällt Glykokoll mit Alkohol ausi). 



Quantitative Bestimmung der Aminosäuren durch Titration. Amino- 

 säuren lassen sich acidimetrisch titrieren, wenn man ihre Lösung mit Formaldehyd 

 versetzt 2). Dieser verbindet sich mit der Aminogruppe und die entstehenden Methylen- 

 verbindimgen, z. B. bei GlykokoU COOH • CH2 ■ N : CHg ^), haben sauren Charakter. Nur 

 bei Einhaltung bestimmter Bedingungen werden bei der Titration zuverlässige Resultate 

 erhalten. Eine quantitative Bestimmung der Aminosäure neben Ammoniak im Urin wird 

 folgendermaßen ausgeführt: 50 ccm Urin werden in einem 100 ccm fassenden Meßkolben 

 abgemessen, Phenolphthalein (1 ccm einer i/oproz. Lösung) nebst 2 g festem Bariumchlorid 

 hinzugefügt, dann nach Umrühren eine gesättigte Lösung von Bariumhydroxyd zu roter Farbe 

 und darauf noch weitere 5 ccm zugesetzt (zur Fällung der Phosphate). Man füllt nun auf 

 100 ccm auf, läßt den Kolben nach dem Umschütt«ln etwa 15 Minuten stehen und filtriert 

 durch ein trocknes Filter. 80 ccm des klaren Filtrats (entsprechend 40 ccm Urin) werden 

 in einem Meßkolben durch Zusatz von 1/5 n-Salzsäure mit Lackmuspapier als Indicator neu- 

 tralisiert und bis auf 100 ccm verdünnt. In gleichen Teilen dieser Flüssigkeit führt man nun 

 einmal eine Ammoniakbestimmung durch Abdestilheren des Ammoniaks unter vermindertem 

 Druck aus der alkalisch gemachten Lösung und Auffangen in titrierter Säurelösung und das 

 andere Mal eine Titration unter Zusatz von Formaldehyd aus*). Zu 40 ccm der Lösung 

 (entsprechend 16 ccm Urin) gibt man etwa 10 ccm neutralisierter Formolmischung (dargestellt 

 durch Versetzen von 50 ccm 30 — 40 proz. Formaldehydlösung unter Zusatz von 1 ccm 0,5 proz. 

 Phenolphthaleinlösung in 50 proz. Alkohol mit i/äU-Barythydratlösung bis zur schwachen 

 Rotfärbung). Nun titriert man mit 1/5 n- Barytlauge oder Natronlauge. Multiphziert man 

 die gefundene Menge (in Kubikzentimetern) mit 2,8 2), so erhält man die Menge von Amino- 

 säurestickstoff + Ammoniakstickstoff (in Gramm). Von dieser Zahl wird die bei der gleich- 

 zeitig ausgeführten Ammoniakbestimmimg ermittelte Menge an Ammoniakstickstoff ab- 

 gezogen und so die Menge des Aminosäurestickstoffs erhalten. Bei der Formaltitrierung 

 muß bis zu starkroter Farbe mit Phenolphthalein als Indicator titriert werden; am besten 

 stellt man sich eine Kontroilösung dar, die Aminosäure und Formol in annähernd gleicher 

 Konzentration enthält -wie die zu untersuchende Lösung, und deren roten Farbenton (nach 

 der Neutralisation) man zum Vergleich heranzieht s). Harnstoff, Kreatin, Kreatinin und 

 Hippursäure beeinflussen die Formoltitration nicht. Falls Polypeptide im Harn vorhanden 

 sind, fällt die Bestimmung des Aminosäurestickstoffs zu niedrig aus. In diesem Falle er- 

 mittelt man in 50 ccm Urin in der angegebenen Weise den Gehalt an Aminosäurestickstoff, 

 zu anderen 50 ccm fügt man verdünnte Salzsäure und extrahiert 6 mal mit Essigester (zur 

 Entfernung der Hippursäure). Darauf bringt man den Harn in einen Kolben, fügt 50 ccm 

 konz. Salzsäure zu und kocht I1/2 Stunden. Nach dem Sieden entfernt man möghchst viel 

 Salzsäure auf dem Wasserbade, löst in Wasser und unternimmt eine Formoltitration und 

 Ammoniakbestimmung. Die Zunahme des Aminosäurestickstoffs nach dem Kochen mit 

 Salzsäure gibt den im Urin vorhandenen peptidartig gebundenen Stickstoff an. — Die durch 

 Essigester extrahierte Hippursäure kann in analoger Weise zu einer titrimetrischen Bestim- 

 mimg verwandt werden (vgl. bei „Hippursäure") 6). Bei Gegenwart von Ammoniak oder 

 Ammoniumsalzen gibt die Bestimmung des Aminosäurestickstoffs geringere Werte, als dem 

 berechneten entspricht (vor allem beim Glykokoll) ') 8) 9). Daher wird in einer Ammoniumsulfat 

 enthaltenden Lösung das Ammoniak zunächst nach Zusatz von Barythydrat durch einen Luft- 

 strom ausgetrieben, was nach 2 Stunden erreicht ist 1**) 11). — Die Formoltitration der Amino- 



1) Farbwerke vorm. Meister, Lucius u. Brüning, D. R. P. Kl. 12g, Nr. 141976. 



2) S. F. L. Sörensen, Biochem. Zeitschr. T, 45 [1907]. 



3) Schiff, Annalen d. Chemie u. Pharmazie 3S5, 348 [1902]. 

 *) V. Henriques, Zeitschr. f. physiol. Chemie 60, 1 [1909]. 



5) S. P. L. Sörensen, Biochem. Zeitschr. T, 64 [1907]. — V. Henriques u. S. P. L. Sö- 

 rensen, Zeitschr. f. physiol. Chemie 63, 27 [1909]; vgl. auch H. Malfatti, Zeitschr. f. physiol. 

 Chemie 61, 499 [1909]. 



6) V. Henriques u. S. P. L. Sörensen, Zeitschr. f. physiol. Chemie 63, 27 [1909]. 



7) L. de Jager, Zeitschr. f. physiol. Chemie 62, 333 [1909]; 65, 185 [1910]. 



8) T. Yoshida, Biochem. Zeitschr. 23, 239 [1909]. 



9) L. de Jager, Zeitschr. f. physiol. Chemie 61, 105 [1910]. 

 10) W. Frey u. Gigon, Biochem. Zeitschr. 22, 309 [1909]. 



") V. Henriques u. S. P. L. Sörensen, Zeitschr. f. physiol. Chemie 64, 120 [1910]. 



