Aliphatische Aminosäuren. 551 



den nach dem E. Fi seh er sehen Esterverfahren aufgearbeiteten Mutterlaugen. 3 kg ober- 

 gärige Brauereihefe, Rasse XII, die nach der Selbstverdauung nach der Estermethode ver- 

 arbeitet war, lieferte 2 g reines Leucin^). 



In den meisten Fällen wird die Hydrolyse mit Salzsäure vorgenommen und das Produkt 

 nach dem E. Fischerschen Esterverfahren verarbeitet. Dabei befindet sich Leucin haupt- 

 ^ sächlich in den Fraktionen, die bei 10 mm Druck von 70 — 90° sieden 2). Nach dem Verseifen 

 des Esters ist der Vorgang derselbe wie zuvor. 



Darstellung aus d, 1-Leucin, Das beste Verfahren ist die Spaltimg von d, 1-Leucin 

 durch das Brucinsalz der Formyl Verbindung 3). 1,6 kg d, 1-Leucin werden in 8 Portionen for- 

 myUert (s. d, 1-Formylleucin). Ausbeute 1350 g umkrystaUisiertes d, l-FormyUeucin. Dabei 

 werden 235 g Leucin zurückgewonnen. Die Spaltung der Formylverbindung geschieht zweck- 

 mäßig in Mengen von 50 g in 3 1 Alkohol mit 124 g wasserfreiem Brucin (s. d- und 1-Formyl- 

 leucin). Die Ausbeute an dem auskrjretaUisierenden Brucinsalz des d-FormyUeucins ist 80°o 

 der Theorie. Die Mutterlauge liefert ebenfalls 80°o der entsprechenden 1-Verbindimg3). Die 

 Hydrolyse der Formylverbindung erfolgt am besten mit lOproz. Bromwasserstoffsäure. 



Darstellung durch Pankreatinverdauung des Esters. Durch asymmetrische 

 Spaltung des d, 1-Leucinpropylesters mittels Pankreatin, das von Lipase mögUchst frei ist*). 

 Zur Darstellung der Fermentflüssigkeit werden 1,6 g Pankreatin (Rhenania) mit 20 ccm Wasser 

 und 3 ccm Toluol kräftig durchgeschüttelt und bei 37° 23 Stunden stehen gelassen. 3 ccm 

 des klaren Filtrates werden mit 7ccm Wasser verdünnt und nach dem Versetzen mit 0,5 ccm 

 Toluol, 0,1 ccm Phenolphthaleinlösung unter Eiskühlung mit n-Natronlauge neutralisiert. 

 Die so hergestellte Lösung verseift den d, 1-Leucinpropylester kräftig. 10 ccm der Ferment- 

 flüssigkeit werden mit 10 g Ester durchgeschüttelt und 11 Stunden bei 25° aufbewahrt. Bald 

 beginnt die Leucinausscheidung. Solange noch möglich ist, schüttelt man jede halbe Stimde 

 durch, später wird mit einem Spatel sehr sorgfältig etwa 10 mal durchgerührt. Bei größeren 

 Mengen ist es empfehlenswert, fortgesetzt mechanisch zu rühren. Zum Schluß gibt man 10 ccm 

 Alkohol und 10 ccm Äther zu, rührt um, läßt einige Minuten stehen, saugt ab, wäscht bis 

 zum Verschwinden des Estergeruchs mit Äther und reinigt durch L'mkrystaUisieren. Ausbeute 

 3 g oder 83% der Theorie an 1-Leucin, das [a]D in 20proz. Salzsäure = -f 15° + 0,4° zeigt 

 (0,7016 g, Gesamtgewicht 25,033)*). 



Darstellung von d, I-Leucin: Aus natürlichem Leucin^). 40 g eines noch braun ge- 

 färbten Rohleucins werden in 600 ccm heißem Wasser gelöst und mit 40 g gelbem Bleioxyd 

 , im Autoklaven 7 Stimden auf 165° erhitzt. Die Flüssigkeit wird heiß filtriert, der Rück- 

 stand noch mehrmals mit Wasser ausgekocht imd die vereinigten Filtrate mit Schwefelwasser- 

 stoff behandelt. Das eingedampfte Fütrat wird mit siedendem 25proz. Alkohol ausgelaugt, 

 in welchem das eventuell vorhandene Tyrosin sehr schwer löslich ist. Die mit Tierkohle ent- 

 färbte Lösung wird in der Wärme bis zur KrystaUisation des racemischen Leucins mit Al- 

 kohol versetzt. Ausbeute etwa 25 g an reinem Präparat 8). 



Darstellung aus Isovaleraldehyd^). 50 g Isovaleraldehyd werden in 100 ccm 

 Äther gelöst imd unter Kühlung mit trocknem Ammoniak gesättigt. Das bei der Reaktion 

 sich bildende Wasser wird abgetrennt, die ätherische Lösung mit wenig Kaüumcarbonat durch- 

 geschüttelt, filtriert und unter vermindertem Druck bei höchstens 25° verdampft. Man sus- 

 pendiert den öligen Rückstand in 100 ccm Wasser und versetzt unter Kühlung mit 36 ccm 

 50proz. Blausäure. Nach 12stündigem Stehen imd öfterem Umschütteln wird ein Gemisch 

 von 400 ccm Salzsäure (spez. Grewicht 1,19) und 200 ccm Wasser zugesetzt, wobei ein klumpiger 

 Niederschlag ausfällt. Durch längeres Kochen wird dieser zur Lösung gebracht, nach Zusatz 

 von 200 ccm Wasser zwei Stunden weiter gekocht und zur Entfernung der Salzsäure auf dem 

 Wasserbade verdampft. Man erwärmt den Rückstand mit etwa 60 ccm Wasser, übersättigt 

 schwach mit Ammoniak, fütriert nach dem Erkalten das ausgeschiedene Leucin und wäscht 



1) F. Ehrlich u. A. Wendel, Biochem. Zeitschr. 8, 399 — 437 [1908]; Zeitschr. d. Vereins 

 d. d. Zuckerind. 1908, 294—326. 



2) E. Fischer, Berichte d. Deutsch, ehem. Gesellschaft 39, 596 [1906]. 



3) E. Fischer, Berichte d. Deutsch, ehem. Gesellschaft 39, 2928 [1906]. — E. Fischer u. 

 O. Warburg, Berichte d. Deutsch, ehem. Gesellschaft 38, 3997 — iOOö [1905]. 



*) 0. Warburg, Zeitschr. f. physiol. Chemie 48, 205 — 213 [1906]; Berichte d. Deutsch, 

 ehem. Gesellschaft 38, 187—188 [1906]' 



S) E. Fischer, Berichte d. Deutsch, ehem. Gesellschaft 33, 2372 [1900]. 



^) Limpricht, Annalen d. Chemie u. Pharmazie 94, 243 [1855]. — E. Fischer, Berichte 

 d. Deutsch, ehem. Gesellschaft 33, 2372 [1900]; Anleitung zur Darstellung organischer Präparate. 



