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bis zur Entfernung des Chlorammoniums mit Wasser. Ausbeute 25 g, und sie wechselt nach 

 der Qualität des verwandten Isovaleraldehyds. Zur völligen Reinigung wird das Rohprodukt 

 aus ziemlich viel heißem Wasser unter Verwendung von Tierkohle umkrystallisierti). 



Nach F. Ehrlich 2) kann man die Anwendung der Blausäure vermeiden, indem man 

 100 g Isovaleraldehyd in 1 1 Äther gelöst mit 80 g feingepulvertem Cyankalium versetzt und 

 in die Mischung unter Kühlung und Schütteln 96 ccm konz. Salzsäure eintropft. Nach 24 stün- 

 digem Stehen wird die Ätherlösung abgegossen, unter vermindertem Druck verdampft und das 

 öl mit 220 ccm einer lOproz. alkoholischen Lösung von Ammoniak versetzt. Die Mischung 

 bleibt 4 — 5 Tage stehen oder sie wird nach 1 — 2 Tagen im Autoklaven 1 — 2 Stunden auf 80 bis 

 90° erhitzt. Zur Verseifung trägt man zunächst unter Kühlung 300 ccm konz. Salzsäure 

 und nach einigem Stehen noch dasselbe Volumen verdünnter Salzsäure in die Flüssigkeit. 

 Dann wird die Mischung zur Vertreibung des Alkohols auf dem Wasserbade erwärmt, darauf 

 zweimal unter Zusatz von Wasser auf direkte Flamme bis auf ein kleines Volumen ein- 

 gekocht, heiß mit Tierkohle behandelt, das Filtrat unter vermindertem Druck konzentriert 

 und nach nochmahger Aufnahme mit Wasser vollständig verdampft. Die Lösung des Rück- 

 standes in wenig Wasser gelöst gibt beim Versetzen mit Ammoniak 75 g d, 1-Leucin, aus dem 

 nach der Reinigung 65 g zu gewinnen sind 2). 



Darstellung von d-LeucIn: Mittels Vergärung aus d, 1 - LeucinS). 250 g Raffinade 

 werden mit 10 g d, 1-leucin in 2^/2 1 Leitungswasser durch schwaches Erwärmen gelöst. In 

 die abgekühlte Lösung werden 100 g frische Preßhefe eingetragen. Die sehr intensive bei Zim- 

 mertemperatur verlaufende Gärung ist nach 2 Tagen beendet. Die eingedampfte Lösung 

 scheidet Krystallmassen aus, die nach dem Umkrystallisieren etwa 3,8 g reines d-Leucin hefem. 



Aus d, 1-Leucin. Man spaltet die Formyl Verbindung des d, 1-Leucins durch das 

 Brucinsalz (s. Formyl -d-leucin) und erhält bei der Hydrolyse mit Brom wasserstoffsäure 

 d-Leucin*). 



Bestimmung: Die genau quantitative Bestimmung des Gehaltes eines Eiweißkörpers 

 an 1-Leucin stößt auf Schwierigkeiten, da aus dem bei der Hydrolyse erhaltenen Gemisch 

 der Aminosäuren durch Fraktionieren der Ester kein reines 1-Leucinäthylester erhalten werden 

 kann^). Bei der Verseifung der unter etwa 12 mm Druck von 60 — 100° (Temperatur des 

 Wasserbades) aufgefangenen Esterfraktion 6) erhält man ein Gemisch, das hauptsächlich aus 

 1-Leucin, d-Isoleucin und d-Valin besteht. 



Beim Eindampfen der wässerigen Lösung krystallisiert ein Teil dieser Aminosäuren aus. 

 Das Filtrat wird zur Trockne gebracht und das Prolin durch Auskochen mit Alkohol entfernt. 

 Die in Alkohol unlösUchen Aminosäuren werden in Wasser gelöst und möglichst zahlreiche 

 Kjystallfraktionen durch Einengen dargestellt und von jeder die Schmelzpunkte ermittelt. 

 Die ersten Fraktionen bestehen aus Leucin und Isoleucin, dann folgen Gemische von Leucin 

 und Valin und dann solche von Valin, Alanin und GlykokoU. Die leucinhaltigen Fraktionen 

 werden in die Kupfersalze übergeführt. Trotz der verschiedenen Löslichkeit im Wasser lassen 

 sich die Kupfersalze des Leucins und VaUns nicht durch fraktionierte Kj-ystallisation trennen, 

 da sie die Neigung haben, zusammen zu krystallisieren'). Durch Auskochen der trocknen 

 Kupfersalze mit Methylalkohol wird aber Isoleucin- und Valinkupfer entfernt 8). 1-Leucin und 

 d -Isoleucin lassen sich von d- Valin quantitativ durch Fällen der wässerigen Lösung mittels 

 Bleiacetat und Ammoniak trennen, wobei das leicht lösliche Bleisalz des d-Valins in Lösung 

 bleibt. Leucin und Isoleucin können alsdann mittels der Kupfersalze getrennt werden, unter 

 Benutzung von Methylalkohol als Lösungsmittel, wobei das Leucinkupfer ungelöst bleibt 9). 



1) Limpricht, Annalen d. Chemie u. Pharmazie 94, 243 [1855]. — E. Fischer, Berichte 

 d. Deutsch, ehem. Gesellschaft 33, 2372 [1900]; Enleitung zur Darstellung organischer Präparate, 



2) F. Ehrlich, Berichte d. Deutsch, ehem. Gesellschaft 40, 2559 [1907]. 



3) F. Ehrlich, Biochem. Zeitschr. 1, 8—31 [1906]. 



*) E. Fischer u. O. Warburg, Berichte d. Deutsch, ehem. Gesellschaft 38, 3997—4005 

 [1905]. 



6) E. Fischer, Berichte d. Deutsch, ehem. Gesellschaft 39, 596 [1906]. 



6) E. Abderhalden, Neuere Ergebnisse auf dem Gebiete der speziellen Eiweißchemie. 

 Jena 1909. S. 18. 



7) E. Fischer, Zeitschr. f. physiol. Chemie 33, 151 [1901]. 



8) F. Ehrlich u. A. Wendel, Biochem. Zeitschr. 8, 399 [1908]. * 



9) P. A. Levene u. Beathy, Biochem. Zeitschr. 4, 307 [1907]. — P. A. Levene u. D. D. 

 van Slyke, Biochem. Zeitschr. 13, 440—457 [1908]; Joum. of biol. Chemistry 6, 391—418 [1909]. 

 — P. A. Levene u. W. A. Jacobs, Biochem. Zeitschr. 9, 231—232 [1908]. 



