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davon enthält, entfernt das Bariumsulfat durch Filtration und fällt nun mit konz. Phosphor- 

 wolframsäure aus. Aus dem mittels Baryt zerlegten Niederschlag werden die salzsauren Salze 

 der Basen dargestellt und diese in gut getrocknetem Zustand zuerst mit kaltem Alkohol (etwa 

 vorhandenes Cholin- oder Stachydrinchlorid geht in Lösung), dann mit kochendem Alkohol 

 (löst die Chloride von Betain und Trigonellin) behandelt. Lysinchlorid bleibt zum größten Teil 

 ungelöst zurück. Ein Teil kann in Lösung gehen und wird von den übrigen Basen durch Aus- 

 fällung derselben in alkoholischer Lösung mit Mercurichlorid getrennt. Der größte Anteil 

 des Lysinchlorids findet sich neben Alkalichlorid in dem in Alkohol unlöslichen Rückstand 

 und kann durch Ausziehen mit Methylalkohol isoliert werden. Am zweckmäßigsten ist es 

 wohl, den lysinhaltigen Salzrückstand in Wasser zu lösen, die Lösung mit der von den Queck- 

 silberdoppelsalzen des Cholins, Betains usw. abfiltrierten Mutterlauge zu vereinigen und 

 sodann das Lysin durch Mercurichlorid und Barytwasser auszufällen i). Man zerlegt den 

 dabei erhaltenen Niederschlag unter Zusatz von etwas Schwefelsäure durch Schwefelwasser- 

 stoff, fällt aus der vom Schwefelquecksilber abfiltrierten Lösung das Lysin wieder durch 

 Phosphorwolframsäure, zerlegt den Niederschlag mittels Bariumhydroxyd und führt das in 

 Freiheit gesetzte Lysin in bekannter Weise in das leicht krystaUisierende Pikrat über. 



2. Aus dem Gemisch der Spaltungsprodukte bei der Eiweißhydrolyse. Die 

 Methode ist im wesentlichen gleich jener, deren man sich zur quantitativen Bestimmung des 

 Lysins bedient (s. unten). Es müssen erst die Aminosäuren, Histidin und Arginin entfernt 

 werden ; sonach wird das Lysin durch Phosphorwolframsäure und aus der erhaltenen Fällung 

 über das Pikrat gewonnen. Man verfährt entweder so, daß man erst alle drei Hexonbasen mit 

 Phosphorwolframsäure fällt und hierauf Histidin und Arginin aus diesem Niederschlage mittels 

 Silbemitrat und Baryt entfernt, oder man fällt erst Histidin und Arginin als Süberverbmdungen 

 und trennt im Filtrat das Lysin von den nichtbasischen Spaltprodukten mittels Phosphor- 

 wolframsäure (und Pikrinsäure). Ist die Spaltung des Eiweißkörpers durch Alkalien erfolgt, 

 oder waren die Spaltprodukte der Einwirkung einer Arginase ausgesetzt, so wird sich bei der 

 angegebenen Trennungsmethode neben I-ysin auch das aus dem Arginin gebildete Ornithin 

 vorfinden. Ebenso können unter Umständen auch die durch Phosphorwolframsäure bei ge- 

 nügender Konzentration fällbaren Aminosäuren (a-Prolin, Phenylalanin) hier auftreten. 



In eigentümlicher Weise haftet das Lysin dem ungereinigten Tyrosin an. Bei der Hydro- 

 lyse des Caseins mit 25proz. Schwefelsäure wurde ein Tyrosin erhalten, welches bei der Rei- 

 nigung durch Umkrystallisation Mutterlaugen lieferte, aus denen durch Phosphor wolfram- 

 säure basische Verbindungen gefällt werden konnten. Bei Zerlegung der Phosphorwolframate 

 krystallisierte erst die Diaminotrioxydodecansäure aus; aus der Mutterlauge wurde Lysin 

 mit Hilfe des Pikrates gewonnen 2). 



Wül man aus einem Hydrolysengemisch nur LyBin darstellen, so kann man nach S z yd - 

 lowskis) erst esterifizieren , die Ester entfernen durch Ausschütteln mit Ätheralkohol, mit 

 Phosphorwolframsäure fällen, die Fällung in Wasser lösen und Pikrinsäure eintragen. In der 

 Kälte fällt das Lysinpikrat aus. 



Über die Zersetzung der Phosphorwolframate durch verdünnte Säuren und Äther siehe 

 E. Winterstein*). 



Bestimmung von Lysin :&) Der zu imtersuchende Eiweißkörper wird in einer entsprechen- 

 den Menge, je nach dem Stickstoffgehalt, z. B. 20 — 50 g, mit einer Mischimg der dreifachen 

 Menge seines Gewichtes konz. Schwefelsäure und der sechsfachen Menge seines Gewichtes 

 Wasser 14 Stunden am Rückflußkühler gekocht. Die Spaltungsflüssigkeit wird sodann mit 

 Wasser verdünnt, filtriert, zum Liter aufgefüllt und zur Feststellung des Gesamtstickstoffs 

 in 10 ccm derselben der Stickstoff nach Kjeldahl bestimmt. 



Die Entfernung der Huminstoffe, des Histidins imd Arginins und ihre Bestimmung siehe 

 Steudel (1. c). 



Im Filtrat vom Niederschlag der Silberverbindimgen von Histidin und Arginin wird 

 das Silber und der Baryt entfernt, mit Schwefelsäure bis 4 Volumprozent versetzt und unter 

 Vermeidung eines größeren Überschusses mit Phosphorwolframsäure gefällt. Der Niederschlag 



1) E. Winterstein, Zeitschr. f. physiol. Chemie 45, 77 [1905]. 



2) E. Fischer u. Abderhalden, Zeitschr. f. physiol. Chemie 42, 540 [1904]. 



3) Szydlowski, Monatshefte f. Chemie 2T, 821 [1906]. 



4) E. Winterstein, Zeitschr. f. physiol. Chemie 34, 15 [1901]. 



ß) Steudel in Abderhaldens Handbuch der biochem. Arbeitsmethoden 2, 11, 498 [1910]. — 

 Weiß, Zeitschr. f. physiol. Chemie 52, 114 [1907]. 



