1016 Purinsubstanzen. 



Nucleoproteid 



Eiweiß Nuclein 



Eiweiß Nucleinsäure 



Nucleotinsäure Purinbasen 



I 

 Pyrimidinbasen, Pentosen, Phosphorsäure 



Isolierung der Amino- und Oxypurine (und Pyrimidinbasen) aus nuclein- 

 haltigemMateriali). Die Organe werden mit verdünnten Mineralsäuren ( 1 — 5%) 5 — 6 Stunden 

 lang gekocht. Die 5 proz. schwefelsaure Lösung der durch Eindampfen ammoniakfrei gemachten 

 Reaktionsprodukte — Purin- und Pyrimidinbasen — wird mit Phosphorwolframsäure be- 

 handelt, die Fällung gut mit 5 proz. Schwefelsäure ausgewaschen und mit Ätzbaryt zerlegt, 

 der phosphorwolframsaure Baryt mehrmals ausgekocht. Aus den vereinigten, mit Schwefel- 

 säure schwach angesäuerten Filtraten werden mit neutralem Silbemitrat die Purinbasen in 

 Form ihrer Silbemitratverbindungen ausgefällt, welche dann durch Digerieren mit Ammoniak 

 in ihre Silberverbindungen übergeführt werden. 



Die so erhaltenen Purinbasen werden nach Krüger und Salomon^), oder da die 

 Aminopurine die Hauptmenge, die Oxypurine in der Regel nur die geringeren Mengen dar- 

 stellen, nach Krüger und Schittenhelm^) getrennt. Die salzsaure Lösung wird zunächst 

 mit Ammoniak behandelt, wobei das Guanin ausfällt, während die anderen Purinbasen in 

 Lösung bleiben. Das ausgefallene Guanin wird nochmals mit 10 proz. Ammoniak aufgekocht 

 und stehen gelassen. — Die ammoniakalischen Filtrate werden durch Eindampfen vom Am- 

 moniak befreit, mit Salzsäure angesäuert und zur Trockne verdampft, die überschüssige Salz- 

 säure durch mehrmaliges Abdampfen mit Wasser und Alkohol vertrieben. Der Rückstand 

 wird in Wasser gelöst und mit Natriumpikrat gefällt. Dabei erhält man das Adeninpikrat. 

 Das Filtrat wird, nach Entfernung der überschüssigen Pikrinsäure durch Ausäthem, mit 

 ammoniakalischer Silberlösung gefällt, die Fällung mit Salzsäure zerlegt und das Filtrat ein- 

 gedampft. Bei der Digestion des Rückstandes mit Wasser (bei 40°) bleibt Xanthin ungelöst. 

 Das Hypoxanthin geht in Lösung und wird als Pikrat oder Nitrat identifiziert. Aus dem 

 Filtrat der Purinsilbemitratfällung werden die Pyrimidinbasen gewonnen (s. diese). 



Nach dieser Methode wurde das verschiedenste tierische imd pflanzUche Material bzw. 

 dessen Nucleoproteid untersucht. Die Spaltprodukte, welche sich dabei ergaben, waren immer 

 dieselben: 



1. Purinbasen (Guanin, Adenin, Xanthin und Hypoxanthin); 



2. Pyrimidinbasen (Thymin, Cytosin, Uracil); 



3. Kohlenhydrate; 



4. Phosphorsäure. 



Die quantitative Bestimmung der Purinbasen im Harn und anderen Flüssig- 

 keiten erfolgt nach Ludwig und Salkowski*) (ammoniakalische Silberlösimg) oder Krüger 

 und Schmid*) ( Natriumbisulf it + Kupfersulfat) nach vorausgegangener Entfernung der Harn- 

 säure (nach derselben Methode) in deren Filtrat. In tierischen usw. Organen nach Burian 

 und Walker Halls). 



Vorkommen der Purinbasen: Der Nachweis von freien Purinbasen in tierischem Ge- 

 webe ist im wesentlichen Kos sei zuerst gelimgen. Hypoxanthin war bereits lange vorher 

 — seine weite Verbreitung in tierischen und pflanzlichen Organen hat später Kossei dar- 

 gelegt 6) — aus dem Blut und der Milzpulpa von Leukämieleichen isoliert worden'). Neben 

 diesem gewann Kossol aus tierischen Organen und aus der Hefe Xanthin^), dann auch 



1) Steudel, Zeitschr. f. physiol. Chemie 42, 165 [1904]. — Abderhalden, Handbuch der 

 biochem. Arbeitsmethoden 3, 584, 610. 



2) Krüger u. Salomon, Zeitschr. f. physiol. Chemie 26, 373 [1898/99]. 



3) Krüger u. Schittenhelm, Zeitschr. f. physiol. Chemie 35, 153 [1902]. 



*) Abderhalden, Handbuch der biochem. Arbeitsmethoden 3, II, 888 [1910]. 



5) Burian u. Walker Hsll, Zeitschr. f. physiol. Chemie 38, 336 [1903]. 



6) Kossei, Zeitschr. f. physiol. Chemie 3, 284 [1879]; 5, 267 [1881]. 



") Scherer, Verhandl. d. physikal.-med. Gesellschaft Würzburg 2, 321 [1862]. — Mosler 

 u. Körner, Virchows Archiv 25, 142 [1862]. 



8) Kossei, Zeitschr. f. physiol. Chemie 6, 422 [1882]. 



