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§ 18. Die Urease. 



Im Jahre 1876 wies Musculus (1 u. 2) auf das Vorkommen eines 

 Enzymes in fadenziehend und ammoniakalisch gewordenen Harnen gewisser 

 Kranker hin, welches bei Abwesenheit von Kleinlebewesen den Harnstoff in 



5 Ammoniinnkarbonat umzuwandeln vernnige. Er hielt dieses Enzym für 

 eine krankhafte Ausscheidung der Harnblase. Pasteur und Joubert (1) 

 bestritten diese Annahme und erklärten die von ihnen in einem ähn- 

 lichen Falle beobachtete Harnzersetzung als enzymatische Wirkung des 

 von ihnen dann als Harnstoffvergärer beschriebenen Micrococcus. 



10 Die Bereitung und Gewinnung dieses Enzymes ist zum ersten Male 

 im Jahre 1890 durch P. Miquel (12) versucht worden. Er gab ihm 

 zunächst den Namen Urase, änderte diesen aber später dann, ent- 

 sprechend einem durch Bourquelot gemachten Vorschlage, in den besser 

 klingenden Namen Urease um. Er erhielt es auf die Weise, daß er 



15 höchst gärkräftige Harnstoff bakterien in günstig zusammengesetzter 

 Bouillon züchtete. 



Nachfolgend angegebenes Verfahren läßt eine recht gute Ausbeute 

 erzielen. In einem geräumigen Gefäße, enthaltend wässrige Pepton- 

 lösung oder noch besser eine mit Pepton versetzte Bouillon, sät man, 



20 nachdem man für alkalische Reaktion durch Zugabe von Ammonium- 

 karbonat oder vorteilhafter 2 — 3 g Harnstoff pro Liter gesorgt hat, eine 

 sehr gärkräftige Art von Harnstoffbakterien ein und hält dann die 

 Zucht bei 30— 35'^ C. Um die Vermehrung der Zellen anzueifern, kann 

 man einen sehr schwachen Strom keimfreier Luft hindurchtreiben und 



25 sich zu dem Zwecke eines Gefäßes mit flachem Boden bedienen, wie es 

 z. B. zur Darstellung des Diphtherietoxines in Gebranch ist. Nach Ab- 

 lauf einiger Tage, oft schon nach 48 Stunden, enthält die Flüssigkeit 

 so viel Enzym, daß dadurch im Liter 40 — 60 g Harnstoff in der Stunde 

 zersetzt werden. Der Gehalt daran steigt bis zum Ende soweit an, daß 



sodann in der gleichen Zeitspanne 100 — 120 g Harnstoff gespalten werden 

 können. Man kann diese an Urease nun reiche Bonillon durch ein 

 Biskuit-(Porzellan-)Filter treiben, ohne daß sie eine nennenswerte Ein- 

 buße an Wirkungskraft verlöre, vorausgesetzt, daß dazu mehrere Liter 

 verwendet worden sind. 



35 Die ureasehaltige Bouillon bewahrt ihr Zersetzungsvermögen durch 

 3 — 4 Monate, soferne zu ihr nur eine sehr geringe Menge von Luft zu- 

 treten kann oder solche überhaupt durch eine Atmosphäre von Leucht- 

 gas oder eines anderen unschädlichen Gases abgehalten ist. Wenn solche 

 Bouillon durch Verunreinigung mit Fremdkeimen in Zersetzung gerät, 



40 verschwindet die Urease darin binnen wenigen Tagen vollständig:. 



Die für die Hydrolyse durch dieses Enzym günstigste Temperatur 

 liegt zwischen den Grenzen von 48 und 50 " C. Bei der oberen erleidet 

 es bereits eine teilweise Zersetzung; diese ist eine vollständige binnen 

 zwei Stunden, wenn die Temperatur von 70—75 ° (' einwirkt, und binnen 



45 einer Minute, wenn 80 " C gewälilt worden sind. Kälte von — 5 " C schwächt 

 es in 5—6 Tag-en merklich, zerstört es jedoch nur langsam. Bei 0*' C 

 halten sich Uieastdösungen sehr gut. Versuche zur Anreicherung an 

 diesem Enzym durch Ausfrieren haben kein befriedigendes Ergebnis 

 gehabt. 



50 Einige Stoffe, wie Saccharose und Glycerin, vermögen die Wirkungs- 

 kraft der Urease zu verdoppeln und zu verdreifachen, vielleicht da- 



