— 122 — 



sondern nnd demg^emäß Gelatine zu verflüssigen vermögen. So findet 

 man im A^'asser. Boden, in der Lutt stets verflüssigende Arten und ge- 

 rade ihre weite Verbreitung weist den proteolytischen Bakterienenzymen 

 eine bedeutsame Eolle. teils schädlicher, teils nützlicher Xatur im Gärungs- 



ögewerbe zu. Dabei ist allerdings zu beachten, daß zwischen den einzelnen 

 Stämmen derselben Bakterienart große Diff"erenzen in bezug auf die 

 Menge des produzierten Enzyms bestehen können, daß namentlich auch 

 bei der längeren Züchtung auf künstlichen Nährböden das Verflüssigungs- 

 vermogen erheblich sinken kann. 



10 Nachweis: Die Existenz proteolytischer Enzyme läßt sich sowohl 

 in Eeinkulturen, wie in Bakteriengemischen (Faulflüssigkeiten etc.) in 

 verschiedener ^^'eise nachweisen. Alle Methoden zielen darauf ab. die 

 Gegenwart der lebenden Keime auszuschalten oder wenigstens ihre Ent- 

 wicklung zu hemmen. Dieses Ziel kann man erreichen: 1. Durch Er- 



i5hitzen der betreftenden enz^-mhaltigen Flüssigkeit auf 55—60". In- 

 dessen werden hierdurch nicht sicTier alle Bakterienarten abgetötet. 

 Andrerseits beweisen Fermi's Versuche, daß es Bakterienenzyme gibt, 

 die schon bei dieser Temperatur vernichtet werden. Dieses Verfahren 

 ist daher als das schlechteste zu bezeichnen. — 2. Durch keimfreies 



20 Filtrieren der Flüssigkeit mittelst Ton- oder Kieselgurfilter. — 3. Durch 

 Zusatz von antiseptisch wirkenden Verbindungen. Als solche kommen 

 hauptsächlich in Betracht: Karbolsäure. Salicylsäure. Thymol, Toluol, 

 Natriumflorid. Vom Sublimat wird man der fällenden Wirkung halber Ab- 

 stand nehmen, vom ('hloroform wegen seiner Flüchtigkeit bei etwas erhöhter 



25 Temperatur. Nach eigenen Versuchen kann der Verfasser am meisten das 

 Toluol empfehlen, das stets entwicklungshemmend wirkt und unter allen 

 Antisepticis am wenigsten die Enzymwirkung beeinträchtigt. Die Flüssig- 

 keit muß mit dem Toluol — ca. 5 — 10 ccm auf 1 Liter Flüssigkeit — 

 gut durchgeschüttelt werden. Als Prüfungsobjekt für die qualita- 



3otive proteolytische ^^'irkung empfiehlt sich am meisten die gewöhnliche, 

 sterilisierte Nährgelatine oder das Fibrin. Fermi versetzt die Gelatine 

 noch mit einem antiseptischen Zusatz (7 Gramm reine Gelatine in 

 100 Gramm gesättigter wässeriger Thymollösung oder Karbolwasser). 

 Indessen ist dieser Zusatz, wenn die zu untersuchende Flüssigkeit, die 



35 in Mengen von 1 — 2 ccm auf die in Eeagenzröhren befindliche starre 

 Gelatine geschichet wird, mit Antisepticis versehen wurde und die 

 Gelatine sterilisiert war. nicht notwendio-. 



Die proteolytische Wirkung wird hier durch die Verflüssigung der 

 oberen Gelatineschichten erkannt. Statt des gewöhnlichen Fibrins kann 



40 man auch Karminfibrin (Grübler. Leipzig) benutzen, das ebenso wie 

 das gewöhnliche Fibrin in der Flüssigkeit suspendiert wird, aber durch 

 die bei Eiweißlösung auftretende rote Färbung der Flüssigkeit leichter 

 den Effekt beurteilen läßt. Für viele Bakterienenzyme dürfte auch 

 Eijkman's (1) Milchagar (Magermilch zu gewöhnlichem Agar wie 1 : 3 



45 bis 1:6, getrennt sterilisiert) zum Nachweis geeignet sein, das durch 

 caseinspaltende Enzyme aufgehellt wird. 



Quantitative IJestimmuiii?: 1. Zur Orientierung über die quan- 

 titative Wirkung bei vergleichenden Hestimmungen brauchbar ist die 

 FERMi'sche ]\Iethode. In Keagenzgläser von 8 mm Durchmesser werden 



50 3 ccm Thymol- oder Karbol-Gelatine (7 proz.) gefüllt. Die Gelatine muß in 

 genau senkrechter Lage erstarren, der obere Eand der Gelatineschicht 

 wird am Glase markiert. Sodann werden 1 — 2, eventuell auch mehr ccm 

 der zu untersuchenden Flüssigkeit, gegebenenfalls noch Aiit antiseptischem 



