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man eine größere Anzahl von Kölbchen beimpft so wird man fast immer 

 in einigen von ihnen den Nitratbildner rein erhalten. Um Gewißheit 

 darüber zu erlangen, beimpft man Bouillon mit einigen Tropfen nitratierter 

 Flüssigkeit: die Bouillon darf sich dadurch in der Folge nicht ver- 



5 ändern. Die ganze Arbeit der Abscheidung des Organismus aus dem 

 Boden nimmt nicht weniger als 2 — 3 Monate in Anspruch, da man vor- 

 erst noch einige Ueberimpfungen (2 — 3) in Nitritlüsung vornehmen muß. 

 um erst dann an die Züchtung auf Nitritagar zu schreiten. 



Die mikroskopische Untersuchung kann auch über die Reinheit der 



10 Kultur bis zu einem gewissen Grade Aufschluß geben. Der Nitratbildner 

 ist nämlich durch seine schwere, darin an das Verhalten von Sporen 

 erinnernde Färbbarkeit von den ihn begleitenden kleinen Stäbchenarten 

 zu unterscheiden: wenn man also mit Gentianaviolett einige Sekunden 

 lang kalt färbt, so werden die gutgefärbten Stäbchen, die man im 



15 Präparate trifft, nicht dem Nitratbildner sondern irgend einer verun- 

 reinigenden Art angehören; zwischen diesen wird man dann bei auf- 

 merksamer Untersuchung ganz farblose Stäbchen in Menge finden, welche 

 gerade die des Nitratbildners sind. 



Für das Studium der Morphologie der Zellchen dieses Or- 



2oganismus eignen sich die Zuchten auf Nitritagar am besten. Nach dem 

 Färben mit Karbolfuchsin unter Erwärmen und darauffolgendem 

 Waschen mit verdünntem, angesäuertem Alkohol, erscheinen die Zellchen 

 stäbchenförmig, am einen Ende oder an beiden verjüngt, unter 1 .« lang 

 und etwa 0,3 — 0,'* /.i dick. Die Färbung ist dabei keine gleichmäßige; 



•iänur der mittlere Teil der Stäbchen erscheint gefärbt, die zugespitzten 

 Enden dagegen sind fast farblos (vgl. Fig. n auf Taf. V). Bei Anwendung 

 von LoEFFLER'schem alkalischem Methylenblau färben sich nur die in den 

 Zellclien (meistens in der Einzahl) vorhandenen Körnchen kräftig: der übrige 

 Teil des Zelleibes ist so blaß, daß man mit Mühe die Kontouren der Stäb- 



30 eben um die Körnchen herum sucht. Wenn man nicht stark genug färbt, 

 sieht man nur Häufchen dieser unmeßbar kleinen Körnchen, Aveil man 

 die Stäbchen nicht unterscheiden kann. Schon nach dieser Behandlung 

 beobachtet man um die Stäbchen einen farbigen Hof, welcher das Vor- 

 kommen einer Seh leim hülle oder Kapsel vermuten läßt. Um 



.3.0 diese hervortreten zu lassen, färbt man durch einige Sekunden mit 

 Gentianaviolett unter Erwärmen, wäscht aber nicht mit Wasser, sondern 

 mit 2 proz. Kochsalzlösung und untersucht in einer solchen von 10 Proz. 

 Gehalt. Die Zellchen erscheinen dann von violetten Höfen umgeben, 

 die nach außen sich verlieren, nach innen dagegen farblose Körperchen 



40 scharf umgrenzen. Diese letzteren erscheinen dann nicht so klein, etwa 

 1,2-1,5 |K lang und 0,6—0,7 /< dick. Offenbar schlägt sich bei dieser 

 Behandlungsweise der Farbstoff auf den äußersten verquollenen Teilen 

 der Hülle nieder; die Hülle selbst aber mit der eingeschlossenen Zelle 

 bleibt ungefärbt. Durch halbstündiges Erwärmen in Gentianaviolett- 



läLö.sung gelingt es, die Körperchen auszufärben und nun innerhalb der 

 farblos gebliebenen Kapsel die winzigen, schwach gefärbten Stäbchen 

 zu unterscheiden. 



Der Nitratbildner scheint keine Schwärmer zu bilden. We- 

 nigstens ist es bis jetzt nicht gelungen, solche mit Sicherheit zu be- 



50 obachten. 



