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Wesentlich ist anscheinend der Zusatz von Anilin für die Violettfärbiuig, 

 Vom Quecksilber ist sie nicht abhängig, da die Violettfärl)ung auch nach Fixierung 

 mit FLEMMiNG-Fixage eintritt. Die Xukleolen von Galtonia candicans färben sich 

 weniger deutlicla violett, während sich die Eiweißkristalle von Galtonia sehr schön 

 violett färben, so daß die Xatur des Eiweißkörpers anscheinend von Bedeutung 

 für den Eintritt der Violettfärbung ist. (Die Methode ist unter meiner Leitung von 

 Herrn Kiehn durchgearbeitet worden). ^ 



Methylviolett. Mit Sublimateisessig fixierte und in der oben angegebenen Art 

 gewaschene Wurzelspitzen. Die Schnitte woirden in einer Lösung von 0,2 g Gen- 

 tianaviolett (Grübler) in 100 ccm Wasser gefärbt. Aufnahme des Farbstoffes: 

 Nach 0,25 Minuten ist alles blau gefärbt. Am hellsten ist das Zytoplasma und die 

 Grundmasse des Kernes, dann foglen die Xukleolen, schließlich die am intensivsten 

 lilau gefärbten Chromatinkörner des Kernes. Xach 1 Minute sind die Xukleolen 

 blau und annähernd so intensiv gefärbt, wie die Chromosomen der sich teilenden 

 Kerne. 



Differenzierung der 0,5 Stunden gefärbten Schnitte mit Xelkenöl: In einigen 

 Minuten blassen Chromatinkörner, Xukleolen und Chromosomen ziemlich gleich- 

 artig ab, auch nach 24 Stunden ist keine Differenz in der Intensität der Färbung 

 der noch deutlich erkennbaren Gebilde zu finden. 



Safranin. Mit Sublimateisessig fixiertes Material. Gefärbt wiirde in einer Lö- 

 sung von 2 g Safranin (spirituslöslich, Grübler) in 50 ccm 95proz. Alkohol + 

 50 ccm Wasser. Xach 15 Sekunden sind Zytoplasma und Kerngrundmasse hellrot, 

 dunkelrot die Chromatinkörner und Xukleolen, nach 5 Minuten nur die Xukleolen 

 noch dunkler geworden. Xach 14 Stimdeu ist alles intensiver gefärbt, die Xukleolen 

 am kräftigsten. Es färben sich also die Xukleolen am langsamsten durch; sie nehmen 

 aber am meisten Farbstoff auf. 



Die Entfärbung in 95proz. Alkohol, dem auf 100 ccm 1 — 2 Tropfen Salzsäure 

 zugesetzt worden sind, erfolgt in der Reihenfolge Zytoplasma, Kerngrundmasse, 

 Chromatinmasse, Chromosomen, Xukleolen. Xacli 3 — 6 Minuten treten die Xukleo- 

 len als am stärksten gefärbte Gebilde hervor. 



Fuchsin. Mit Subliraateisessig fixiertes Material. Es verläuft alles wie bei der 

 Safraninfärbung, nur tritt die Durchfärbung schneller ein, so daß schon nach 5—10 

 Minuten die Kerne so dunkel gefärbt sind, daß man Xukleolen und Chromosomen 

 nicht mehr sehen kann. Dementsprechend verläuft auch die Herauslösung des Farb- 

 stoffes schneller. In wenigen Minuten ist schon mit reinem, 95proz. Alkohol das starke 

 Hervortreten der Xukleolen erreicht. 



Fixiertes Material mit 2 liintereinander angewandten Farbstoffen gefärbt. 

 Fixiert mit Flemming- Lösung, gefärbt mit Safranin, dann mit Methylviolett. 



Xachdem die Schnitte des mit mittlerer FLEMMING-Lösung fixierten Materials 

 durch Wasserstoffsuperoxyd gebleicht worden waren, wurden sie 3 Tage m der Kü- 

 vette in der Safraninlösung gefärbt, dann schnell in zwei Küvetten mit 95proz. 

 Alkohol getaucht. Bei der Färbung brauchen die Xukleolen die längste Zeit zur 

 völligen Durchfärbung und die Durchfärbung der Gebilde findet in der umgekehrten 

 Reihenfolge statt wie die gleich zu beschreibende Entfärbung. Die Differenzierung 

 erfolgte auf dem Objektträger mit Säurealkohol. Xach 1 bis 2 Minuten sind die Xuk- 

 leolen noch dunkehot, die Cliromosomen und die Chromatinkörner der ruhenden 

 Kerne hellrot, das Zytoplasma und die Kerngrundmasse schwach rot. Bei längerer 

 Differenzierung bleiben die Xukleolen am längsten dunkel, doch wird zuletzt alles 

 gleichmäßig hellrot. 



Die bis zur möglichsten Deutlichkeit der Xukleolen differenzierten Präparate 

 wurden zuerst in Döproz. Alkohol, dann einige Minuten in Wasser abgespült und dann 

 in der Küvette in der Metlxylviolettlösung 5 — 10 Minuten gefärbt. Xach dieser 

 Zeit sind alle Teile der Zelle intensiv blau gefärbt. Die Präparate ^^Tirden auf dem 

 Objektträger mit Xelkenöl bedeckt mid es trat dann schon nach einigen Sekunden 

 eine starke Verminderung der Blaufärbung des Zytoplasmas und der Kerngrund- 

 masse ein, während die Chromosomen noch dunkelblau gefärbt blieben, und die Xu- 

 kleolen sehr bald rot gefärbt hervortraten. 



Fuchsin, danach Methylenblau (siehe Rosen 1892). Schnitte von mit Subli- 

 mateisessig fixiertem Material wurden einen Tag in einer Lösung von 1 g Fuchsin 

 in 100 g Wasser gefärbt, hierauf einige Minuten mit Säurealkohol differenziert, 

 dann kurze Zeit in eine wässerige Methylenblaulösung 2 : 1000 gestellt mid mit 

 absolutem Alkohol ausgewaschen. 



