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Der Umstand, daß das Indican bei gewissen Pflanzenarten durch 

 Ammoniak gespalten wird, bei anderen z. B. beim Färbeknöterich, 

 Polygonum tinctorium, nicht, spricht dafür, daß das Indican nicht in 

 allen Indigopflanzen identisch sein dürfte (Molisch IV, 271). Wie 

 sehr ich mit dieser Behauptung Recht hatte, geht aus den Untersuchungen 

 Beijerincks hervor, der ja für den Waid eine von Indican verschiedene 

 Muttersubstanz des Indigblaus nachgewiesen hat. 



Für den mikrochemischen Nachweis empfiehlt sich folgende 

 Methode: Die Alkohol- und Ammoniakprobe (Molisch IV, VIII). 

 Man bringe die Pflanzenteile in ein zylindrisches, mit gut eingeriebenem 

 Stöpsel verschließbares Glasgefäß von etwa 100 bis 200 ccm Volumen 

 und stelle gleichzeitig auch eine kurze Eprouvette mit absolutem Alkohol 

 oder Ammoniak ein. In dieser Atmosphäre verweilen die Objekte ge- 

 wöhnlich 24 Stunden. Dünne Pflanzenteile können auch kürzere Zeit 

 darin belassen werden, dickere hingegen (Stengel, Scheinknollen von 

 Phajus usw.) müssen, wenn sie nicht gehörig zerkleinert worden sind, 

 mehr als einen Tag den Dämpfen ausgesetzt bleiben. Falls mit dem 

 längeren Verweilen in dem Alkoholdampf die Gefahr einer Austrocknung 

 verknüpft sein sollte, kann man ihr passend dadurch vorbeugen, daß 

 man die Innenseite des Glasgefäßes mit nassem Filtrierpapier auskleidet. 



Während des Verweilens der Pflanzenteile in der Alkoholatmosphäre 

 erleidet das Indican in den Zellen eine Zerlegung, was sich z. B. an 

 den weißen Blüten von Calanthe durch eine intensive Blaufärbung und 

 an grünen Organen, z. B. an den Blättern von Polygonum tinctorium, 

 Calanthe, Phajus und anderen wegen des das Indigblau deckenden 

 Chlorophyllfarbstoffes durch eine entsprechende Verfärbung zu erkennen 

 gibt. Nach der Behandlung mit den erwähnten Dämpfen legt man die 

 Objekte in absolutem Alkohol ein, um das Chlorophyll zu extrahieren. 

 Sobald dieses weggeschafft ist, gibt sich die Verteilung des Indigblaues, 

 besonders auf weißer Unterlage, durch eine mehr oder minder intensive 

 Blaufärbung zu erkennen. 



Zum Zwecke der mikroskopischen Untersuchung bettet man 

 Schnitte oder Bruchstücke der in der eben angegebenen Weise be- 

 handelten Pflanzenobjekte entweder direkt oder noch besser nach dem 

 Abspülen in reinem Wasser in Chloralhydrat (5 Teile Chloralhydrat auf 

 2 Teile Wasser) ein, worin die Gewebe sich schön aufhellen und das 

 Indigblau deutlich erkennen lassen. 



Diese Methode hat überdies den großen Vorteil, daß man nach 

 der Extraktion des Chlorophylls gewönlich schon mit 

 bloßem Auge die Verteilung des Indigblaus in den ver- 

 schiedenen Organen oder in der ganzen Pflanze übersieht. 

 So läßt ein nach dem erwähnten Verfahren (Alkoholdampf) behandelter 

 blühender Zweig vom Färbeknöterich die Laubblätter, abgesehen von 

 der Mittelrippe und den Seitennerven, tiefblau, die Ochrea, den Stengel 

 und die Blüten aber in ihrer natürlichen Farbe erscheinen. Es leistet 

 somit diese Methode für den Indicannachweis Analoges 

 wie die sogenannte SACHSsche Jodprobe für den Stärke- 

 nachweis. 



Es muß hervorgehoben werden, daß es durchaus nicht gleichgültig 

 ist, ob man für die Indicanprobe Alkohol, Ammoniak oder Chloroform 

 verwendet, da die verschiedenen Indigo liefernden Pflanzen darauf ver- 



