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des Pilzes für die Pflanze in ihrer Ernährung liegt. Der Pilz verschafft, 

 da die Orchideen im allgemeinen nur ein schwach entwickeltes Wurzel- 

 system haben und überdies sehr wenig transpirieren, die notwendigen 

 Nährsalze und macht die organische Substanz des Nährbodens zu- 

 gänglich. — 



Wenn der Pilz für das Aufkommen der Orchidee von so ausschlag- 

 gebender Bedeutung ist und die gewöhnliche Anzucht von Orchideen aus 

 Samen meist zu keinem befriedigenden Ergebnis geführt hat, da man das 

 Zusammentreffen der Orchideen mit dem Pilz dem Zufall überließ, so war 

 nunmehr der Weg für eine rationelle Kultur klar vorgezeichnet: der reine 

 Same mußte mit dem reinen Pilz zusammengebracht, die 

 Symbiose mußte künstlich zustande gebracht werden. 



Zu diesem Zwecke muß der Pilz aus den Wurzeln der Orchideen isoliert 

 und rein gezüchtet und der Same möglichst rein aus der Samenkapsel ge- 

 wonnen werden. Wie man dabei des näheren vorzugehen hat, hat Burgeff 

 in einem besonderen Buche ^), das sich auch an die Praktiker wendet, aus- 

 führlich dargestellt. Nur das AUerwesentlichste sei daraus angedeutet. 

 Isolierung des Pilzes. Junge verpilzte Wurzeln werden zunäch'^t oberflächlich 

 unter dem Strahl der Wasserleitung von Erde gründlich gereinigt, mit Pinsel und Seife 

 gewaschen, mit sterilisiertem (d. h. durch Kochen keimfrei gemachten) Wasser ab- 

 gespült und in einer reinen Glasschale auf steriles Fließpapier aufgelegt. Nun reinige 

 man das Mikroskop mit einem Bäuschchen Wolle und Benzin und lege einen sterilen 

 Objektträger mit einem sterilen Wassertropfen auf den Mikroskoptisch. Dann nehme 

 man ein etwa 10 cm langes, in der angegebenen Weise gereinigtes Wurzelstück zwischen 

 den aseptischen Daumen und Zeigefinger, entferne noch einmal die alten Schnittflächen, 

 stelle mit dem abgeflammten Messer Längsschnitte von der Wurzel her und bringe 

 sie in den Wassertropfen unter das Mikroskop. Ist ein Schnitt mit lebendem Pilz- 

 mycel gefunden, so halte man, durch das Mikroskop schauend, mit einer Nadel den 

 Schnitt in der Mitte fest und schneide rasch die Oberhaut, der die meisten Bakterien 

 anhaften, herunter. Nun werden mehrere Zellen des verpilzten Gewebes heraus- 

 gerissen und tunlichst rasch auf den Boden einer Kulturschale in das Nährsubstrat 

 übertragen. Hier wachsen die Pilze aus dem Gewebe in die Umgebung heraus und 

 von den Randhyphen kann nach 8 — 14 Tagen mit einer sterilen Platinnadel abgeimpft 

 werden, wodurch man, eventuell nach mehrfacher Wiederholung dieses Vorganges, 

 schließlich zu tadellosen Pveinkulturen gelangt. 



Als Nährsubstrat verwendet Burgeff folgende Nährlösung: 



1 g KH2PO4 (Monokaliumphösphat), 



0,5 g NHgCl (Ammoniumchlorid), 



0,1 g CaCl2 (Chlorkalzium), 



0,1 g NaCl (Chlornatrium), 



0,3 g MgSOi + 7H2O (Magnesiumsulfat), 



0,01 g FegCle (Eiscnc'hlorid), 



1000 g dest. Wasser (oder noch besser reines Regenwasser), 

 der noch 15 g Agar und je nach Bedarf 0,5 — 5 g Stärke zugesetzt wird. 



Als Kulturgefäße dienen größere Glasröhren (20: "2 cm), in denen man die steri- 

 lisierte Nährlösimg bei schiefer Lage der Röhre erstarren läßt. Auch Glaskolben lassen 

 sich, wenn man mehr Pflanzen kultivieren will, mit Vorteil verwenden. 



1) Burgeff, H., Die Anzucht tropischer Orchideen aus Samen. Jena 1911. 

 Vgl. auch Schlechter, R., Die Orchideen usw. Berlin 1915. p. 761. 



