§ 7. Die Assiinilatioii von Stickstnffgas dunh Haktcrion. 129 



Menoz/.i \) Bestätigung. Die lieniiihungcn Hertiielots, die wirksamen 

 Mikroben zu isolieren, scheiterten jedocli. und Berthelot kam dazu, 

 eine ganze Reihe von Organismen, schließlicli aucli Schimmelpilze mit 

 der StickstolVfixierung im Ackerl)0(len in \'crl)indung zu bringen, unter 

 diesen Verhäitnis.sen war es ein aubeiordentlicher Ei'iblg. als es lf^l)3 

 zuerst WiNOGRADSKY ■-) gelang, sein Clostridium i'asteurianum, einen 

 großen anaeroben, dem FiTZSchen Bacillus butyncus ähnlichen Bacillus 

 aus verschiedenen Bodenproben zu isolieren, welcher sicher aus einer 

 von Ammoniak etc. sorgfältig befreiten Luft seinen Stickstoffbedarf zu 

 schöjifen vermag und hierbei in zuckerhaltiger Nährlösung Buttersäure- 

 gärung hervorruft. In zwei \'ersuchen auf 4 Proz. Zucker enthaltendem 

 Nahrsubstrat^ , welches anfangs absolut stickstofffrei war, betrug der 

 Stickstoffgewinn nach 20 resp. 15 Tagen '2X,H1 mg resp. 24,68 mg 

 Stickstoff. WiNOGRADSKV sprach die Vermutung aus, daß das Bakterium 

 im Plasma aus freiem N und nascierendem Wasserstoff (welcher bei der 

 ButtersäuregäJ-ung entsteht) vielleicht zunächst Ammoniak bilde. Sehr 

 geringer Zusatz von Ammoniak oder Nitrat beschleunigte wohl die 

 Zuckei'vergärung des Mikrol)en, vermehrte jedoch nicht (len endlichen 

 Stickstoffgewinn: organische Stickstoffverbindungen waren wirkungslos. 

 Fügte WiNOGRADSKY auf 100 g Zucker mehr als 0,0 g Ammoniak- 

 oder Nitrat-N hinzu, so iKUte die Fixierung des Luftstickstoffes gänzlich 

 auf. Unter den von Winogradsky gebotenen Kulturbedingungen fixierte 

 das Clostiidium für 1 g verabreichte Dextrose ungefähr 2,5—3 mg 

 freien Stickstoff. Von biologischem Interesse ist, daß der (nach Wino- 

 gradsky augenscheinlich auf der Erde sehr weit verbreitete, doch nicht 

 in jedem Boden vt)rk<)muu:i)dej N-fixierende Mikrobe in der Natur stets 

 mit zwei aeroben Arten vergesellschaftet vorkommt, welche wahrscheinlich 

 füi' die Herstellung dei- erforderlichen Sauerstoifarmut der Bodenluft 

 dienlich sind und liierliir von ihrem Symbionten Stickstoffverbindungen 

 zur Verfügung gestellt, erhalten. Auf (ielatine wuchs das Clostridium 

 in Winogradskys Kulturen nicht; es wurde auf Möhrenscheiben und 

 in tiach ausgebreiteter Schicht zuckerhaltiger P^lüssigkeit kultiviert: 

 10(H) Wasser, 1 K3PO4; 0,5 MgSO^ : 0,01—0,02 NaCl, FeSO^, MnSO^; 

 20—40 Dextrose und CaCO;^-Zufügung. 



Einige -Jahre später isolieiten Krüger und Schneidewind =*) von 

 den Versuchsfeldern in Halle ein N-fixierendes Bakterium, welches binnen 

 02 Tagen 4,0—8,5 mg Luftstickstoff in Eiweiß-N überführte, Eine 

 genaue P)eschreibung zweier weiteier Formen von N-fi.\ierenden Mikroben 

 lieferte hierauf Beijerinck*) in seiner interessanten Arbeit über ,.oligo- 

 nitrophihi" Bakterien. Mit diesem Namen bezeichnete er jene Bakterien, 

 welche in Nährsubstraten „ohne absichtlich zugefügte N-Verbindungen, 

 aber auch ohne daß Fürsorge getroffen wird, um die letzten Spuren 

 dieser Verbindungen zu entfernen" leben können. Die gewöhnlichen 

 saprophytischen Bakterienformen mit großem Bedürfnis an organischen 

 N-Verbindungen faßt Beijerinck als „polynitrophile" Arten zusammen, 



1) Paonoii., Compt. rend., Toiun CX, p. 910 (1890): B. Tacke, Landw.. 

 Jahrb., Bd. XVIIT, p. 4:^9 (1K8S); H. Immenookff, ibid., Bd. XXI. p. 281 (1892); 

 Ai.rE n. -Menoz/C), Kochs Jahri?sber., 1892, p. 21 il — 2) 8. Winogradsky, Compt. 

 rend., Tome UXVI, p. 1385 (1893): Tome CXVIII. p. 353 (1894); Arch. scienc. 

 biolog. Pötcrsbourg, Tome III, p. 297 ( I89f>) ; Centr. Bakt. (II), Bd. IX, p. 43 

 (1902). — 3) Kuü(iER u. ScuNEiDEWiND, i.andw. Jahrb., Bd. XXIX, p. 801 (1900). 

 — 4) Beijerinck, Centr. Bakt.. Bd. VII, p. ö6l (1901): Arch. N^erland. (II), 

 Tome VIII, p. 190, 319 (1903). 



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