§ 6. Nitratbildung aus Nitrit und Ammoniak: Nitrifikation durch Bacterien. 183 



Nach den spezifischen Erregern der Nitrifikation wurde aber von 

 MiLES, MuNRO, Celli und Marino Zucco vergeblich gesucht (i); ja 

 Frank (2) ging so weit, die mikrobische Natur der Nitrifikation im 

 Boden wieder gänzlich in Abrede zu stellen. 1887 brachten Hueppe 

 und Heraeus(3) die wichtige Erkenntnis, daß die Nitrifikationsmikroben 

 ihre Kohlenstoff- und Stickstoffnahriing aus kohlensaurem Ammoniak 

 beschaffen können, so daß man Bacterien mit „anorganischer Kohlen- 

 stoffnahrung" in diesen Organismen vor sich hat. Die Reinkultur der 

 wirksamen Mikroben gelang jedoch erst 1890 Winogradsky (4), nach- 

 dem dieser Forscher aufgefunden hatte, daß Gelatine oder ein anderer 

 organischer Nährboden als Substrat für diese Bacterien ungeeignet ist, 

 daß sie aber in Nährlösungen rein anorganischer Natur mit Ammonium- 

 salzzusatz, wie sie Winogradsky z^uerst in filtriertem Züricher Seewasser 

 unter Zusatz von Ammoniumsulfat, Dikaliumphosphat und basischem 

 Magnesiumcarbonat anwendete, lebhafte Nitratbildung erzeugen. Wino- 

 gradskys Arbeiten ergaben außer der Bestätigurig der autotrophen 

 Lebensweise der Nitrifikationsmikroben die vollkommen neue Tatsache, 

 daß der Prozeß der Salpeterbildung aus Amm^iak kein einheitlicher ist, 

 sondern durch ein Zusammenwirken von Mikroben bedingt wird. Die 

 eine Bacteriengruppe, welche nach Winogradsky die Gattung Nitro- 

 somonas mit den beiden Arten N. europaea und javanica, und die Gattung 

 Nitrosococcus mit der Art N. brasiliensis umfaßt, oxydiert das Ammoniak 

 zu Nitrit. Ganz andere Mikroben, die in die Gattung Nitrobacter ver- 

 wiesen wurden, greifen Ammoniak nicht an, sondern beschränken sich 

 auf die Oxydation der Nitrite zu Nitrat: Die schwierige Trennung der 

 Nitrosobacterien und Nitrobacter gelang Winogradsky zuerst mit Hilfe 

 der von Kühne eingeführten Kieselsäuregallertnährböden (5). Nitrobacter 

 hingegen vermochte man sehr gut auf Nitritagar zu züchten. Später 

 sind die Nitritbildner von Omellansky (6) erfolgreich auf Magnesia-Gips- 

 platteti und auch auf Papierscheiben kultiviert worden, und Perotti(7) 

 fand Blöcke aus Magnesiumcarbonat zu dem gleichen Zweck vorteilhaft. 

 Nach Omeliansky (8) färben sich die Nitritbildner mit den gewöhnlichen 

 Bacterienfärbungsmitteln, Nitrobacter aber fast gar nicht. Für den letzteren 

 kann man die Sporenfärbung nach Thesing ohne Erhitzen verwenden: 

 Fixierung mit 1% Platinchlorid und Färbung mit kaltem Carbolfuchsin. 

 In der Kultur ist nach Perotti (9) die Incubationszeit mit Nitrosomonas 

 nur 25—26 Stunden, im Boden aber 20—25 Tage. Die Nitritbildung 

 folgt ungefähr einer logarithmischen Kurve. 



1) M. MiLEs, Chem. Zentr. (1887), p. 1317; Biedermanns Zentr, (1887), 8, 

 514; Menozzi, Justs Jahresber. (1888), I, 234. E. A. Munro, Pharm. Journ. Trans. 

 (1887), p. 578. A. Celli u. F. Marino Zucco, Chem. Zentr. (1887), 763; Ber. chem. 

 Ges., 19, Ref. p. 818 (1886). — 2) A. B. Frank, Ber. botan. Ges., 4, 108 (1886). 

 — 3) F. Hueppe, Tagebl. Nat.forsch. Vers. Wiesbaden (1887). W. Heraeus, Journ. 

 f. Gasbeleucht. u. Wa..sserversorg. (1887), Nr. 11. Zentr. Bakt., j, Nr. 13 (1887). 

 Chem. Zentr. (1888\ 1, 125. — 4) S. Winogradsky, Compt. rend., iio, 1013 (1890); 

 Annal. Inst. Pasteur, 4, 213, 257, 760 (1890); 5. 92, 577 (1891); Arch. Sei. Biol., 

 I, 87 (1892). Zentr. Bakt., II, 2, 415 (1896). Lafars Handb. techn. Mykol., j, 132 

 (1904). Über die begleitenden Bakterienformen: P. Bersteyn, Arb. bakt. Inst. 

 Karlsruhe, j, Heft I (1904). — 5) V/. Kühne, Ztsch. Biol.. 27, 172 (1891). Zentr. 

 Bakt., 8, 410. Stevens u. Temple, Ebenda, II, 21, 84 (1908). — 6) W. Omeliansky, 

 Ebenda, 5, 537 (1899); 8, 785 (1902). J. Makrinow, Ebenda, 24, 415 (1909). — 

 7) R. Perotti, Rend. Acc. Line. Roma (5), 14, 11, 228 (1905). Amali di Botan.. 

 j, 43 (1905). Zur Anhäüfungskultur auch: Düggeli, Naturw. Woch.schr., 14, 305 

 (1915). — 8) W. Omeliansky, Zentr. Bakt., II, 19, 263 (1907). — 9) R. Perotti, 

 Rend. Soc. Chim. Roma, 4, 89 (1906). 



