gQ2 Saccharomycetes. 



welchem letzteren aber Hansen meint, daß es nicht zu den. Saccharo- 

 miiceten gehört. 



Bevor wir näher auf die Systematik dieser Organismen eingehen, 

 müssen wir einiges von deren Cj'tologie wissen, lieber eine der elemen- 

 tarsten Fragen, welche jedoch hier sehr schwer zu lösen war, nämlich 

 über die An- oder Abwesenheit eines Kernes, ist sehr viel geschrieben 

 worden, das eine Mal wurde die Anwesenheit bejaht, das andere Mal 

 verneint. 



Die ausgedehntesten Untersuchungen wurden von Guilliermond 

 (1902) publiziert. Seinen Untersuchungen sei folgendes entnommen. 



Er fängt an. auf den Umstand hinzuweisen, daß es bei Keruunter- 

 suchungen in dieser Gruppe unbedingt nötig ist, junge und kräftige 

 Individuen zu wählen, bei welchen das Plasma noch dicht und homogen 

 ist. Später entstehen große Vakuolen, welche das Plasma an die Wand 

 di'ücken, wodurch der Kern zwischen die Vakuole und die Wand gepi'eßt 

 wird und sich zusammenzieht, was den Nachweis sehr erschwert. 



Es kommt noch hinzu, daß sowohl das Plasma wie die Vakuole 

 alsbald Nahrungssubstanzen enthalten, welche sich vielfach intensiver 

 färben als die Kerne und zu falscher Interpretierung Veranlassung 

 geben. Weiter muß dafür gesorgt werden, daß die Zellen in einem 

 günstigen Medium leben, damit verfrühte Degeneration vermieden wird. 

 Die besten Resultate erhielt Guilliermond an Kulturen in Pasteur- 

 scher oder MAYERscher Nährlösung. Stets wurden Reinkulturen in Erlen- 

 MEYERschen Flaschen verwendet. 



Hansen hatte früher nachgewiesen, daß man viele Saccharomyces- 

 Arten zur Sporeubildung bringen kann durch Kultur auf Gipsblöckchen, 

 Guilliermond rät aber von dieser Methode ab, wenn es sich um cyto- 

 logische Fragen handelt, da bei dieser Kulturweise öfters eine partielle, 

 sehr hinderliche Degeneration des Plasmas stattfindet. Die Methode ist 

 also nur zu verwenden, wenn keine andere zum Ziele führt; sie ist 

 übrigens nur verwendbar, wenn die Zellen vorher in einem sehr nahrungs- 

 reichen Medium gelebt haben. 



Am besten verschatft man sich Sporen nach der Methode Reess: 

 Kultur auf Scheibchen von Mohrrüben (Daums), welche in 2 bis 3 Tagen 

 Sporen liefert; das gleiche Medium eignet sich sehr gut zum Studium 

 der Keimungserscheinungen. 



Zum Sammeln, Fixieren und Färben des Materials hat Guilliermond 

 eine für viele Fälle recht geeignete ingeniöse Methode ausgedacht. Er 

 säte nämlich mit den Saccharomyces gleichzeitig Pilzsporen aus, z. B. 

 PenicüUum glaucum, das daraus entstandene Mycel schadet der Hefe 

 nicht, und nimmt man nun später eine Mj^celflocke heraus, so sind 

 darin zahlreiche Hefezellen verwirrt, welche man nun leicht fixieren und 

 färben kann. Hat man genügend Material, so daß der Verlust einer 

 Anzahl von Zellen während der Präparation nicht in Betracht kommt, 

 so kann man selbstverständlich auch direkt fixieren und färben. 



Die einfachste FLxierflüssigkeit ist konzentrierte wässerige Pikrin- 

 säurelösung; sie wird sorgfältig mit 70-proz. Alkohol ausgewaschen. 

 Meistens ist es unnötig, Schnitte zu machen; wo es zur Kontrolle er- 

 wünscht war, benutzte Guilliermond Wagers Methode. 



Dabei werden die fixierten und gefärbten Zellen in eine kleine 

 Flasche mit schwachem Alkohol gebracht, Avelcher allmählich durch stets 

 stärkeren Alkohol, von Xylol und Paraffin ersetzt wird, ohne je die Hefe- 

 zellen herauszunehmen, welche also auf dem Boden des Fläschchens ver- 



