Die pathogenen Kokken. 639 



Verfahren. Außerdem können auf Blutplatten um die Kolonien herum 

 Jielle Höfe entstehen, die nicht durch ein Hämotoxin erzeugt sind. 



2. Ein weiteres, von den pyogenen Staphylokokken erzeugtes 

 Gift ist das Leuko eidin, das 1894 van de Velde entdeckte. Er 

 beobachtete nach Injektion von Leukozyten in die Kaninchenpleura, 

 daß nach Staphylokokkeninjektionen in die Pleura die im Pleura- 

 exsudat befindlichen Leukozyten bald (schon nach 4 Stunden) ab- 

 starben, daß ferner normale Leukozyten, in vitro mit derartigem Pleura- 

 exsudat vermischt, ebenfalls rasch degenerieren und endlich, daß 

 Filtrate von ein- bis zweitägigen Staphylokokkenkulturen (auf Serum- 

 bouillon, Blut) die gleiche Wirkung auf Leukozyten ausüben. Die 

 Leukozyten werden unbeweglich, kugelig; der Kern tritt schärfer hervor, 

 schließlich tritt blasige Degeneration (Vakuolisierung) mit Kernverlust 

 und Auflösung ein. 



Gewinnung des Leukocidins. Sie erfolgt am einfachsten 

 nach der von M. Xeisser und Wechsberg zur Gewinnung des Staphylo- 

 lysins angegebenen Methode (s. c). Die Leukocidinbildung erfolgt 

 vom 4. Tage ab, die stärksten Mengen werden in der Regel am 8. Tage 

 in den Kulturen, die zu filtrieren sind, gefunden. Konservierung er- 

 folgt wie bei Staphylolysin durch Glyzerinkarbol, doch ist das Leuko- 

 cidin labiler und \\'ird eher abgeschwächt als das Staphylolysin. Beide 

 Substanzen sind verschieden: es sind Staphylokokkenstämme bekannt, 

 die nur Hämolysin bildeten, kein Leukocidin, Auch ist es nicht ge- 

 lungen, das Hämolysin aus den Kulturfiltraten der Staphylokokken 

 durch Absorption mit Leukozyten zu entfernen. Für die Leukocidin- 

 o:ewinnung ist zu berücksichtigen, daß die einzelnen Staphylokokken- 

 -Tämme ein sehr verschieden starkes Leukocidin bilden, im allgemeinen 

 -ind die virulenteren Stämme geeigneter. — Will man die Leukocidin- 

 wirkung lediglich demonstrieren, so kann man auch die ursprüngliche 

 Methode van de Veldes wählen: intrapleurale Injektion von Staphylo- 

 kokkenbouillonkultur in übertödlicher Dosis bei Kaninchen, Tötung 

 des Tieres nach einigen Stunden, Aufsaugen des Exsudates, Zentri- 

 fugieren: die obenstehende Flüssigkeit ^^•irkt leukotoxisch. 



Die Gewinnung von Leukozyten für den Leukocidinversuch er- 

 folgt am besten bei Kaninchen, und zwar durch intrapleurale Injektion 

 von Aleuronatbrei (3 Teile Aleuronat, 40 Teile physiologische Koch- 

 salzlösung, davon ca. 10 ccm zur Einspritzung), nach einem Tag Tötung 

 der Tiere, Entnahme des Exsudates, das ää mit l%igem Natrium- 

 oxalat zur Verhütung der Gerinnung versetzt wird. 



An Stelle der mikroskopischen, am besten auf dem heizbaren 

 < 'bjekttisch vorzunehmenden Beobachtung zum Nachweis dieser leuko- 

 toxischen Substanz und ihrer AVirkungsstärke wählt man nach M. 

 Xeisser und Wechsberg die sogenannte bioskopische Methode. 

 Sie besteht darin, daß man frische Leukozyten mit einer schwachen 

 .Methylenblaulösung und Leukocidin in fallenden Mengen versetzt. 

 Lebende Leukozyten reduzieren das Methylenblau zur Farblosigkeit 

 <Leukoverbindung), die Gläser mit durch Leukocidin abgetöteten 

 Leukozyten hingegen bleiben blau, die Reduktion tritt hier nicht ein. 



Leukocidinversuch nach Neisser- Wechsberg. 

 L Bestimmung des Limes reducens. — Steigende Mengen (0,05, 

 0.1 usw.) des Leukozytenexsudates werden mit NaCl auf das Volumen 



Lehrbuch der Bakteriologie. 44 



