BACILLUS TETANI. 



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successivement la grande résistance de ses spores à la chaleur et sa 

 qualité d'anaérobie. En ensemençant du pus de tétanique, il obtient 

 cFabord des cultures impures, contenant, avec le Bacille de Nicolaier, 

 plusieurs autres espèces, aérobies et anaérobies. En chauffant ces cul- 

 tures à 80° pendant trois quarts d'heure, la plupart des espèces étrangères 

 périssent; le Bacille du tétanos subsiste, en gardant toute sa virulence, 

 comme le démontrent les inoculations. En faisant alors, avec ces 

 produits, des cultures sur plaques en présence d'hydrogène, il se déve- 

 loppe des colonies que l'examen microscopique et l'inoculation 

 démontrent être l'espèce en question. Ces colonies servent à ense- 

 mencer d'autres milieux et à 

 inoculer des animaux qui 

 offrent un tétanos typique. 



On peut isoler le microbe à 

 l'état de pureté au moyen de 

 cultures sur plaques par les 

 différents procédés indiqués 

 pour les anaérobies (t. I,p. 307). 

 La méthode très simple de Vi- 

 gnal est particulièrement à 

 recommander. 



Avec ces colonies, il est fa- 

 cile d'obtenir des cultures pures 

 sur diflerents milieux en tenant 

 compte des exigences particu- 

 lières de l'espèce. Le Bacille du 

 tétanos est anaérobie; il végète 

 au mieux en l'absence totale 

 d'oxygène, dans le vide ou dans 



un gaz inerte comme l'hydrogène. Comme le font remarquer Vaillard 

 et Vincent, ce n'est cependant pas un anaérobie tout à fait absolu; il 

 peut croître en présence de faibles proportions d'air, ce qui explique 

 comment il se développe dans les cultures impures où l'oxygène est en 

 majeure partie absorbé par les espèces étrangères qui y poussent avec 

 lui. On pourrait même graduellement l'habituer à croître dans un air 

 à peine raréfié, sans lui voir perdre ses propriétés. Il se développe aisé- 

 ment dans la gélose ou la gélatine, dans les couches profondes, où la 

 diffusion de l'oxygène est arrêtée par les couches supérieures. On 

 prend les tubes de gélatine ou de gélose, contenant de la gelée sur une 

 hauteurde 10 à 12 centimètres, on les soumet à Tébullition pendant une 

 demi-heure pour purgerd'airle milieu, puis on lesrefroiditbrusquement. 

 On les inocule en piqûre profonde et l'on recouvre la surface du milieu 

 dune couche de 1 centimètre d'huile stérilisée. Ou bien, on fait les 

 cultures dans les tubes de Roux, en présence d'hydrogène. Kitasato 

 conseille d'ajouter au milieu une petite quantité d'une substance réduc- 

 trice, 2 p. 100 de glucose, 0,10 p. 100 de sulfo-indigotate de soude, 

 .5 centimètres cubes pour 100 de teinture bleue de tournesol, pour ab- 

 sorber les dernières traces d'oxygène. La méthode de Wùriz et Foureur 

 (t. I,,p. 302) permet d'obtenir aisément de grandes quantités de cultures 

 en bouillon. 



Le microbe se développe aussi bien dans les milieux acides que dans 



Fig.ll. — Cac(7fe8 du têtanns, avec cils. 1000/1, 



