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Ferran (1 ) dit aussi pouvoir obtenir un Bacille du télanos aérobie en 

 agitant fortement au contact de l'air une culture anaérobie en 

 bouillon. 



On peut facilement obtenir des cultures en présence d'air en i'aisanl 

 vivre le Bacille du lélanos en symbiose avec des espèces avides d'oxy- 

 gène. En ensemençant simultanément cette espèce et de vrais aérobies, 

 Bacillus sublilis, l'un des Bacillus mesenlericus, Bacillus anlhracis, 

 Micrococcus prodigiosus, par exemple, on obtient une culture mixte 

 qui montre de nombreux éléments du Bacille tétanique, présente 

 l'odeur spéciale à ses cultures et renferme les produits toxitjues spéciaux 

 qu'il sécrète. Il semble que les espèces formant de beaux voiles, comme 

 les deux premières, donnent particulièrement de bons résultats. 



Debrand (2j recommande surtout l'emploi du Bacillus subtilis comme 

 méthode très facile d'avoir des cultures en bouillon destinées à fournir 

 une toxine tétanique active. Il emploie le bouillon peptonisé ordinaire 

 ou le milieu suivant : 



Extrait de Liebiy- 5 t^rammes. 



Peptone Ghapoteaut.. 10 — 



Chlorure de sodium 5 — 



Eau 1000 — 



Le milieu est largement ensemencé avec le mélange des deux 

 microbes et placé à l'étuve à 34o. Le Bacillus sublilis se développe le 

 premier et forme un voile épais ; le Bacille du lélanos se développe 

 vingt-quatre heures après. Le liquide trouble devient jaunâtre et épais. 

 Après une huitaine de jours, il s'éclaircit et montre un dépôt abondant. 

 L'odeur est la même que celle d'une culture anaérobie pure du Bacille 

 du lélanos. Après un long séjour à l'étuve, on perçoit au contraire une 

 odeur agréable due au Bacillus sublilis. La toxicité du liquide atteint 

 son maximum vers le cinquième ou le sixième jour ; puis l'activité va 

 en s'affaiblissant, surtout si on laisse la culture à l'étuve. 



Pour conserver de la semence, Debrand recommande de procéder de 

 la façon suivante. On fait bouillir pendant deux minutes une culture 

 mixte du sixième jour, pour tueries bâtonnets ; on agite fortement ; 

 on remplit alors des pipettes que l'on scelle à la lampe. Les deux 

 microbes se conservent ainsi longtemps à l'état de spores, en prenant 

 soin de mettre les pipettes à l'obscurité et de les remplir assez complè- 

 tement, le contact de l'air pouvant tuer à la longue les deux sortes de 

 spores. Tarozzi, Pfuhl ont obtenu des cultures en présence d'air dans 

 des milieux additionnés de substances réductrices (Voy. t. I, p. 306). 



PROPRIÉTÉS BIOLOGIQUES 



Le Bacille du lélanos est un anaérobie strict. Il peut cependant se 

 développer en présence de traces d'oxygène, et on vient de voir qu'il 

 peut vivre en présence d'air dans certaines conditions. 



(1) Ferhan, Ueber das aerobische Verhalten des Tetanusbacillus {Centralbl. fur 

 Bakt., XXIV, 1898, p. 28). 



(2) Debrand. Sur un nouveau procédé de culture du Bacille du . {Ann. de Vlnst. 

 Pasteur. XIV, 1900, p. 757. et XVI, 1902, p. 427). 



