BACILLUS TYPHOSUS. 



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sible, à virulence exallée ; il y a, en etlet, un rapport certain entre la 

 virulence du microbe et la toxicité du produit obtenu. 



Méthode de Sanarelli. — Sanarelli (I) obtient une toxine assez active 

 en opérant de la façon suivante : Il ensemence du bouillon glycérine à 

 2 p. 100 avec quelques gouttes de l'exsudat péritonéal d'un cobaye 

 qui a succombé à l'inoculation d'un virus très actif, exalté par des pas- 

 sages successifs dans le péritoine de cobayes, comme il sera indiqué 

 plus loin (p. 81). Les ballons de culture sont placés à 37" pendant un 

 mois, stérilisés à l'autoclave et laissés en repos pendant huit mois à la 

 température de la chambre ; puis ils sont hermétiquement clos et mis à 

 macérer pendant quelques jours à 60°. Le liquide clair est soigneu- 

 sement décanté pour le séparer du dépôt formé des Bacilles morts. Il 

 contient évidemment à la fois les produits di (fusibles formés par les mi- 

 crobes pendant leur vie et des produits adhérents aux corps microbiens, 

 des endotoxines, que la macération sur les microbes morts a pu extraire. 

 Ce qui le prouve bien, c'est que la toxicité augmente avec la durée du 

 contact du liquide avec les microbes. Cette toxine est assez active sur le 

 cobaye, qu'elle tue en injection sous-cutanée à la dose de 2 à 3 centimètres 

 cubes par 100 grammes du poids du corps; le lapin et la souris blanche 

 sont moins sensibles. Les eîfets qu'elle détermine chez le cobaye seront 

 exposés plus loin (p. 85). 



Méthode de Chantemesse. — Chantemesse (2) obtient une toxine brute 

 plus active que celle de Sanarelli en cultivant un Bacille très virulent 

 dans des liquides contenant de la peptone de rate. 



Il se sert d'un Bacille à virulence exaltée par de nombreux passages 

 sur l'animal. Il le cultivait au début dans une macération à froid de 

 rate et de moelle osseuse, additionnée d'un peu de sang humain défi- 

 brin(''. En trente-six heures le Bacille donne un voile sur ce milieu ; 

 vers le quatrième ou cinquième jour, la production de toxine est à son 

 maximum ; elle diminue ensuite, puis cesse complètement vers le 

 quinzième jour. 



Il obtient d'aussi bons résultats avec un bouillon préparé en faisant 

 digérer une rate, dans de l'eau acidulée à l'acide chlorhydrique, par la 

 pepsine d'un estomac de porc, neutralisant et stérilisant. Le liquide est 

 disposé dans des vases à large surface, en contact avec beaucoup d'air, 

 puis ensemencé avec un Bacille très virulent, sortant du corps d'un 

 animal. Après six jours, la sécrétion de toxine est à son maximum, on 

 peut filtrer; elle diminue ensuite. On chauffe à 55° et on centrifuge. 

 Par décantation, on obtient la toxine. 



Cette toxinetueen douze à vingt -quatreheureslecobayedeSOOgrammes 

 à la dose de (3 centimètres cubes en injection intrapéritonéale. Elle 

 est facilement altérable; elle ne peut se conserver qu'en tubes scellés 

 bien remplis et placés à l'abri de la lumière; un chauffage à 58° pendant 

 une heure ne modifie pas l'activité du liquide, mais une température de 

 100» maintenue quelques minutes l'affaibfit beaucoup. Ce caractère de 

 fragilité la distingue de celle de Sanarelli, plus complexe en raison de 



(1) Sanarelli, Etudes sur la fièvre typhoïde expérimentale, 2'- mémoire (Ann. de 

 l'inst. Pasteur, VIII, 1894, p. 193). 



(2) Chantemesse, Sur la toxine typhoïde soluble {Soc. de BioL, 23 et 30 jan- 

 vier 1897). — Toxine typhoïde soluble et sérum antitoxique de la fièvre typhoïde 

 {Congi'ès d'hygiène de Madrid, 1898). 



