BACILLUS TYPHOSUS. l.)l 



apparent au bouL de six heures dans ces cullures d'ensemencement. On 

 parvient ainsi à éliminer aisément d'autres espèces qui, se développant 

 moins vite, n'ont pas encore apparu, et à obtenir en culture pure le 

 Colibacille ou le Bacille ii/phique après deux ou trois passages. 



Cependant, lorsqu'on recherche spécialement le Bacille tijphitjae, 

 comme l'expérience démontre amplement ([ue le Colibacille pousse 

 toujours et plus rapidement que lui dans un mélanjj;e, il serait préférable 

 d'ensemencer de nouveaux tubes non pas dès que le trouble apparaît, 

 mais lorsque la culture est déjà bien développée, comme l'indique 

 Brochard (1). 



De même, pour l'isolement de ces deux espèces en mélange, par les 

 divers procédés de cultures sur plaques, il faut aussi attendre le plein 

 développement des cultures. 



Nous verrons plus loin quelles sont les espèces qui peuvent se 

 développer dans ces milieux phéniqués et comment il est possible de 

 les séparer et de les distinj^uer (p. 134). 



11 est important de noter que, dans le bouillon phéniqué, le Bacille 

 lypliique n'a pas sa forme normale ; il a ses articles très courts, donnant 

 même l'aspect de diplocoques, et est presque immobile. Aussitôt 

 reporté dans du bouillon ordinaire, il reprend son aspect habituel. Le 

 Co//6acz7/e et quelques autres espèces qui végètent dans ces conditions 

 spéciales présentent également la même particularité. 



Procédé de Péré. — Péré(2) conseille aussi les bouillons phéniqués; 

 sa manière d'opérer permet d'employer de grandes quantités d'eau. 

 Voici sa méthode : Dans un ]»allon d'un litre, stérilisé, on introduit 

 100 centimètres cubes de bouillon stérilisé, 50 centimètres cubes d'une 

 solution de peptone pure à 10 p. 100 neutralisée et stérilisée, puis 600 

 à 700 centimètres cubes de l'eau à analyser. On ajoute alors 20 centi- 

 mètres cubes, exactement mesurés, dune solution d'acide phéniqué 

 pur à 5 p. 100 et l'on complète à 1 litre avec l'eau en expérience. Le 

 liquide contient par litre 1 gramme d'acide phéniqué et 830 centi- 

 mètres cubes de l'eau à analyser. 



On le répartit en dix vases stérilisés, fermés avecun tampon d'ouate, 

 que l'on porte à la température moyenne de 34". Il ne faut pas 

 dépasser 36", on riscjuerait de tout tuer. Dans une eau renfermant du 

 Bacille typhique ou du Colibacille, un trouble se produit d'autant plus 

 vite que la proportion de ces microbes est plus forte. On peut déjà 

 observer le trouble dès la douzième heure, plus généralement entre la 

 quinzième et la vingtième heure, seulement vers la trentième si la pol- 

 lution est réduite à des traces. 



Dès que le trouble est apparent, on ensemence de cette première 

 culture dans du bouillon normal qui peut déjà donner une culture 

 pure, et dans quelques tubes à essai contenant une dizaine de centi- 

 mètres cubes d'un mélange stérilisé renfermant, par litre, 1 gramme 

 d'acide phéniqué, 5 grammes de peptone, 100 centimètres cubes de 

 bouillon ordinaire et de l'eau en quantité suffisante pour compléter le 

 litre. On peut faire deux ou trois passages successifs dans ce liquide 



(1) Brochard, Contribution à l'étude des procédés d'isolement du Bacille typhique. 

 Thèse de Bordeaux, 1899. 



(2) Péré, Contribution à l'étude des eaux d'Alger (Ann . de l'In^l. Pasteur, 1891, V, 

 p. 79). 



