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souvenir que certains types de Colibacille ne donnent pas la nuance 

 rosée spéciale. De plus, quand le Colibacille est tant soit peu abon- 

 dant, tout rougit. 



Méthode de Robin. — Robin (1) préconise comme très bonne mé- 

 thodede diflerenciation l'emploi de milieux colorés au blende méthylène, 

 surtout bouillon et gélose. 



Il emploie un bouillon ainsi composé : 



PepLone Collas 5 grammes. 



IMiosphate de soude 0«',05 



Clilorure de sodium O^^SO 



Eau 250 cent, cubes. 



On porte le liquide à Tébullition, puis on ajoute 1 centimètre cube 

 d'une solution aqueuse à 1 p. 100 de bleu soliible pur et. goutte à 

 goutte, d'une solution de potasse normale décime jusqu'à la décolo- 

 ration complète. On cesse alors de chautTer et l'on ajoute 20 grammes 

 de lactose. On fdtre et distribue dans des tubes par 10 centimètres 

 cubes. 



La gélose est obtenue avec la formule suivante : 



Gélose ., 8 grammes. 



Peptone Collas j . . . 5 — 



Phosphate de soude 08'',10 



Bleu soluble à 1 p. 100 1 cent. cube. 



Eau 250 cent, cubes . 



Potasse normale décime 35 cent, cubes environ. 



On chauffe à 115" pour dissoudre la gélose. On doit avoir une solution 

 à peine teintée de gris; sinon il faut ajouter encore un peu de liqueur 

 de potasse en maintenant à l'ébullition, jusqu'à obtention du résultat. 

 On ajoute alors 10 grammes de lactose. On distribue dans des tubes 

 qu'on stérilise à 105° et refroidit inclinés. 



Le Bacille bjphique se développe bien sur ces milieux, enles laissant 

 incolores comme avant. Avec le Colibacille, le bouillon se recolore en 

 bleu avant quinze heures ; sur la gélose, après douze à quinze heures, 

 la coloration Ideue apparaît le long de la strie d'ensemencement, puis 

 envahit progressivement la masse entière. 



Méthode de Kashida. — Kashida (2) a cherché à utiliser, pour la 

 différenciation, la propriété que possède le Colibacille de faire fermenter 

 le lactose et de produire de rammoniacjue aux dépens de l'urée, la 

 première de ces modifications se produisant plus tôt que la seconde. 

 Le Bacille typiuque, au contraire, ne détermine ni l'une ni l'autre de 

 ces réactions. 



Le milieu se prépare de la façon suivante : On ajoute 1.5 p. 100 de 

 gélose à du bouillon bien neutre et l'on fait dissoudre à la chaleur. On 

 examine à nouveau la réaction et l'on neutralise s'il est besoin. On 

 clarifie au blanc d'œuf et l'on filtre. Après filtration, on ajoute 2 p. 100 

 de lactose, 1 p. 100 d'urée et 30 p. 100 de teinture de tournesol bleue. 

 On répartit dans des tubes que l'on stérilise comme d'hal)itude. 



(1) Robin, Sur un nouveau milieu coloré pour la différenciation du Colibacille et du 

 B. d'Eberth (Soc. de liioL, 26 janvier 1897). 



(2) Kashida, DKTerenzierung der T\phusbacillen vom Hacterium coli commune 

 dul-ch die AmmoniakreacLion {CenlraÙ)l. fur Bakt.,XXl, 1897, p. 802). 



