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caractéristique, produisant l'ag-glutination et la réaction de Pfeitï'er, 

 constatent la formation d'un poison soluble. Pour eux, cette production 

 de toxine se fait surtout dans les milieux albumineux, comme Tavaient 

 déjà signalé Metschnikoff, Roux et Salimbeni, au mieux dans un mélange 

 de 90 centimètres cubes de sérum normal de cheval et 10 centimètres 

 cubes de sang défibriné, les deux devant être âgés de trois semaines 

 environ, les sérums frais donnant de mauvais résultats. Ce milieu 

 est chauffé pendant trois heures à 60°; il prend l'aspect d'une gelée 

 brun foncé. 11 doit être employé en couche mince et en large surface 

 pour favoriser l'aération; dans le même but, il est bon d'agiter quoti- 

 diennement. Il est bon d'ensemencer très largement avec au moins le 

 produit de deux tubes do culture sur gélose de vingt-quatre heures. 

 En vingt-quatre heures, le Vibrion a formé à la surface une pellicule 

 grisâtre; en trente-six heures, le milieu s'est séparé en deux parties, une 

 couche profonde comprenant tous les éléments solides, et un sérum 

 recouvert d'une sorte de voile plus ou moins épais. Dès le troisième 

 jour, on a un liquide homogène, uniformément brun. Au septième 

 jour, les cultures présentent leur maximum de toxicité; on filtre sur 

 papier, puis sur bougie. On obtient un liquide brun-acajou, à réaction 

 alcaline. 



Un tel filtrat est toxique dès le quatrième jour. Après le septième jour, 

 la toxicité diminue progressivement. 



Les cultures ne présentent très tôt que de rares éléments mobiles, 

 plus du tout à partir du quatrième jour, en raison de l'agglutination 

 que produit le sérum normal de cheval. 



Le développement du poison paraît en rapport avec la macération des 

 microbes. L'action physiologique est rapide, sans incubation ; elle sera 

 étudiée plus loin (p. 617). Il ne paraît pas qu'on puisse faire une dis- 

 tinction entre la toxine contenue dans les corps microbiens et celle qui 

 ditluse dans le milieu de culture. 



Le principe actif est soluble dans l'eau, précipitable de ses solutions 

 par l'alcool fort et le sulfate d'ammoniaque en excès ; il dialyse à travers 

 les membranes de collodion. L'air et la lumière n'ont qu'une faible 

 action sur lui. 11 paraît assez bien résister à la chaleur. Une tempéra- 

 ture de 100° modifie peu son activité sur le cobaye; pour voir disparaître 

 ses propriétés toxiques à l'égard de cet animal, il faut un chaulïage de 

 vingt minutes à 120°. En se servant du lapin, les résultats varient, et à 

 tel point qu'il peut paraître possible d'admettre, avec Gamaléia (p. 606), 

 l'existence de deux poisons, un thermolabile, l'autre thermostabile. 



Les dernières recherches de Salimbeni (1) démontrent aussi nettement 

 la formation de produits toxiques solubles. 11 se sert d'un milieu assez 

 semblable à celui dont il avait usé précédemment (p. 607). 11 prend du 

 bouillon Martin additionné de 2 p. 100 de gélatine et de 1 p. 100 de sel 

 auquel il ajoute, après neutralisation au tournesol, 12 centimètres cubes 

 de solution normale de soude, déterminant une alcalinité optimum ; 

 au moment de l'usage, il ajoute 25 p. 100 de sérum de cheval, répartit 

 le mélange dans des boîtes stérilisées par 50 centimètres cubes, chauffe 

 pendant trois heures à 60° et ensemence très largement avec des cul- 



(l) Salimbeni, Nouvelles recherches sur la toxine et l'antitoxine cholériques {Ann. 

 de rinst. Pasteur, XXII, 1908, p. 172). 



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