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Pour rechercher la réaction d'agglutination et d(''terminer son titre, 

 on prépare une série de dilutions de sérum anticholérique en solution 

 physiologique, à 1 p. 200, 1 p. 500, 1 p. 1 000, 1 p. 1 500, 1 p. 2 000, môme 

 au-dessus, si Ton veut. On met 1 centimètre cube de chacune de ces 

 dilutions dans de petits tubes; on délaye dans chacun de ces tubes une 

 ose d'une culture sur gélose de dix-huit heures du Vibrion à essayer, 

 de manière à obtenir de suite une émulsion bien homogène; on prépare 

 un ou deux tubes témoins, sans sérum anticholérique, et un autre, si 

 l'on peut, avec du sérum normal de l'espèce animale (jui a fourni 

 l'immun-sérum ; on met à l'étuve à 37°. On observe au bout de deux 

 heures. La réaction est positive lorsque les Vibrions se sont agglo- 

 mérés en grumeaux qui se sont déposés au fond du tube, le liquide 

 situé au-dessus d'eux restant clair. 



On peut aussi constater l'agglutination microscopique, en faisant des 

 préparations aussitôt le mélange fait et les observant à un bon grossisse- 

 mententre lame et lamelle, ou, ce qui est infiniment préférable, en goutte 

 pendante. L'agglutination peut se constater très vite, les Vibrions 

 s'accolanl en formant une sorte de réseau, ou tarder quelque peu. 



Pour ces recherches, on ne doit employer que des cultures sûrement 

 pures, les cultures impures pouvant fort bien ne rien présenter. 



Dunbar (1) a proposé, au moins pour obtenir de suite une indication, 

 d'essayer l'agglutination directement sur les matières fécales, en 

 mélangeant sur lame, à une goutte d'une dilution à 1 p. 500 de sérum 

 anticholérique, une trèspetite quantité de matière suspecte, et d'examiner 

 en goutte pendante. On peut ainsi constater rapidement la production 

 d'agglutination quand les matières fécales constituent une culture [mre 

 ou presque de Vibrions cholériques; quand il y a mélange de nombreux 

 microbes autres, on n'observe rien d'assez certain. 



Bandi (2) conseille l'emploi du procédé suivant : 



On ensemence en surface, avec une ose de matières intestinales, de 

 petits tubes terminés à la partie inférieure par une effilure en pointe, 

 contenant 5 centimètres cubes d'eau peptonée salée à 1 p. 100, à laquelle 

 on a ajouté du sérum anticholérique dans une proportion correspon- 

 dant environ à la moitié de son titre agglutinant. On les met droits à 

 l'étuve à 37° et on examine à partir de deux heures après le séjour 

 jusqu'à sept ou huit heures, de temps en temps. Lorsque le résultat est 

 positif, que l'on a affaire ;i un Vibrion cholérique véritable, des grumeaux 

 se sont formés au fond du tube, s'accumulant surtout dans l'effilure infé- 

 rieure. Bandi donne à ce procédé le nom û' agglutination à l'état nais- 

 sant. 



Les résultats paraissent assez nets lorsqu'on emploie des matières 

 très riches en Vibrions, ne renfermant pas d'autres microbes ou presque ; 

 dans le cas contraire, la réaction ne se produit pas ou est très incom- 

 plète. 



La règle qui semble être devoir adoptée, comme le propose Pottevin f 3), 



(1) DuiNBAR, Zur bakteriolog-ischen Choleradiagnose {Berl. klin. Wochenschr 

 1905, n» 39). 



(2) Ba>oi, Le épidémie colericlie délie Puglie e di Napoli {Rio. crit. di Clin. nied. 

 XI. Firenze, 1910). ' 



(3) PoTTEviiv, Rapport sur le diagnostic bactériologique du clioléi-a iBiill. de l'Office 

 intern. d'hygiène publique, III, 1911, p. 2001). 



