SPIUILLUM PALLIDUM. 683 



Le sang est cenlrilugé et les globules lavés plusieurs fois de suite au 

 centriiugeur avec de la solution physiologique. Pour préparer l'érnul- 

 sion de globules qui doit servir, on met dans de la solution physiolo- 

 gique 5 p. 100 de globules lavés, 1 volume de globules pour 19 volumes 

 de solution, et on émulsionne par agitation. 



Essais des produits. — Pour être certain de Tactivité de ces réactifs 

 divers, il est nécessaire de les éprouver. Pour les produits obtenus très 

 fraîchement, l'essai est moins utile ; il est de rigueur lorsqu'on fait 

 usage de produits conservés. 



Titrage de Vantigène. — On part d'une dilution d'antigène à 1 p. 20 

 dans la solution physiologique. Dans une série de petits tubes on met 

 0cc,l,0cc^2.0cc,3, O^c 4 j'antigèneet, dans les tubes respectifs, 0",7, 0cc,6, 

 0^0,5, 0cc,4 de solution physiologique ; on place une heure et demie à 37" : 

 puis, dans chaque tube on ajoute 0^^°,! de sérum antimouton et 1 cen- 

 timètre cube d'émulsion de globules rouges de mouton à 1 p. 20; on 

 remet à l'étuve. Si l'hémolyse se fait dans les trois premiers, par exemple, 

 la quantité maxima d'antigène à prendre pour une réaction est 0^0,3. 



Titrage du complément. — On part d'une dilution du sérum à com- 

 plément à 1 p. ô de solution physiologique. On met dans une série 

 de petits tubes respectivement Occ,OÎ, Occ,03, Occ,05, O^cj, Otc,2 de com- 

 plément et 0cc,8<), Occ,87, Occ,85, 0cc,8, 0^'^'^ de solution physiologique ; on 

 ajoute à chaque tubeOcc, l de sérum antimouton et 1 centimètre cube 

 d'émulsion de globules rouges de mouton ; on met à l'étuve et on regarde 

 après une demi-heure et une heure. On constate que dans le premier 

 tube l'hémolyse est nulle ; dans le second elle est faible, dans le troisième 

 incomplète ; elle est totale dans les deux autres. La dose à choisir est 

 donc deOcc^i de complément, pour qu'on puisse compter sur une réaction 

 bien nette. 



Titrage de la sensibilisatrice antimon ton (ambocej)teur). — ^ On part d'une 

 dilution à 1 de sérum hémolylique inactivé pour 4 de solution phy- 

 siologique. On en prépare des dilutions à 1 p. 10, 1 p. 20, 1 p. 30, 

 1 p. 40 de solution physiologique. On met 1 centimètre cube de 

 chacune dans de petits tubes, on ajoute 0^*^, 1 de complément et 1 centi- 

 mètre cube d'émulsion de globules rouges de mouton. On agite bien 

 et met à l'étuve à 37" ; on examine après une demi-heure et on note l'état 

 des tubes. Le tube où l'hémolyse se sera faite nettement indiquera le 

 titre du sérum antimouton à employer. Le sérum antimouton doit être 

 essayé avant son inactivation par chautfage; il doit alors nettement 

 provoquer l'hémolyse des globules rouges de mouton. 



Dispositif de la réaction. — On prépare une série de neuf tubes à 

 essai de 1 centimètre de diamètre sur 10 centimètres de longueur, qui 

 devront servir, les uns à éprouver les divers réactifs employés, les 

 autres à instituer la réaction elle-même. 



Ces tubes, ainsi que les pipettes graduées à un dixième de centimètre 

 cube qui doivent servir à mesurer les réactifs, doivent être parfaitement 

 secs, pour éviter toute action d'eau sur les globules rouges, produisant 

 un peu d'hémolyse pouvant rendre la réaction moins nette. Au besoin, 

 on peut les laver à la solution physiologique qui n'altère pas les globules. 



Pour la réaction proprement dite, on utilise les réactifs dans les pro- 

 portions et les dispositions qui suivent : 



