788 ÉTUDE SPÉCIALE DES PRINCIPAUX MILIEUX. 



au développement de toutes les espèces qvii peuvent se rencontrer dans- 

 les eaux. Il en est qui ont des besoins particuliers et ne se développent 

 que dans des milieux ou dans des conditions spéciales. On est conduit 

 forcément à utiliser des procédés qui conviennent à la majeure partie 

 des espèces présentes, quitte à négliger les autres, beaucoup moins 

 nombreuses, ou alors à chercher à obtenir ces dernières par la mise en 

 œuvre de procédés spéciaux qui conduisent à leur isolement, ce qui 

 rentre alors dans lanalyse qualitative el sera exposé ci-après. 



Procédé de Miqiiel. 



Miquel (l)a appliqué à l'analyse de l'eau le procédé de fractionnement 

 des cultures, qui lui avait servi aux examens bactériologiques de l'air, 

 la culture dans du bouillon de parties de substances tellement diluées 

 qu'on puisse être sûr de n'avoir dans chaque ballon qu'une seule espèce, 

 provenantd'un germe unique. Un faible volume déterminé d'eau, 1 cen- 

 timètre cube ou une goutte même si c'est nécessaire, est mélangé par 

 agitation avec 100 centimètres cubes d'eau ou de bouillon stérilisés. 

 Cette première dilution, qui pourra être faite plus faible au besoin, est 

 répartie, tout ou portion seulement, dans une série nombreuse de 

 ballons de petit volume, remplis à moitié de bouillon nutritif, que l'on a 

 privés sûrement de tout germe par une exposition d'une à deux heures 

 dans un autoclave à 115"-120o. Pour que les chances de réussite soient 

 grandes, qu'on puisse avoir une grande probabilité d'être arrivé à une 

 dilution de l'eau à observer suffisante pour qu'une seule Bactérie ou une 

 seule spore se trouve dans le volume mis en ensemencement, il est 

 nécessaire qu'une certaine partie, un bon tiers, des ballons employés 

 reste stérile. Il est souvent commode de faire rapidement une première 

 estimation approchée, pour arriver plus sûrement à un bon résultat. 

 C'est du reste tout simplement une affaire de nombre de ballons ; il faut, 

 pour la plupart du temps, en prendre une assez grande quantité, de 50 

 à 100 et même plus. C'est un des inconvénients du procédé, qui exige 

 une grande installation, une manière de faire compliquée, et n'est alors 

 plus à la portée de la pratique courante. De plus, les milieux liquides, 

 bien que convenant mieux au développement de la plupart des espèces 

 de Bactéries, se prêtent difficilement à leur isolement, lorsque plusieurs 

 espèces croissent ensemble. Il peut fort bien arriver que deux, trois, 

 quatre espèces et plus vivent côte à côte dans un même ballon de cul- 

 ture, sans qu'un œil, même exercé, s'en aperçoive. Enfin, dans les con- 

 ditions les plus favorables, où l'on n'a affaire qu'à des espèces bien et 

 dûment isolées, il est en général beaucoup plus difficile de reconnaître 

 une espèce aux caractères de ses cultures dans les milieux liquides qu'à 

 laide de ceux qu'elle offre lorsqu'elle croît sur les milieux solides habi- 

 tuels. 



Méthode des cultures sur plaques. 



La méthode à recommander est certainement la vraie méthode des 

 cultures sur plaques. Il faut toutefois reconnaître que la manière de faire 



(1) MiQiEL, Annuaire de rOhservaioire de Montsouris, 1880 à 1881, et Analyse bac- 

 tériologique des eaux. Paris, 1891, Gauthier- Villars. 



