792 ÉTUDE SPÉCIALE DES PRINCIPAUX MILIEUX. 



tures, des colonies suffisamment isolées les unes des autres pour pouvoir 

 les compter assez aisément à Toeil nu ou sous la loupe, et au besoin pour 

 pouvoir isoler celles que Ton désire soumettre à des procédés d'investi- 

 gation ultérieurs, surtout examen microscopique et cultures. 



Or, pour faire convenablemenl une numération, dans les conditions 

 habituelles, il est nécessaire que les plaques ne renferment guère plus 

 de 300 à 400 colonies au maximum. Cechitîre est même bien élevé pour 

 permettre de faire des prélèvements de colonies, qui sont alors bien 

 rapprochées; il est préférable de se tenir au-dessous. 



D'un autre côté, les résultats semblent meilleurs lorsqu'on met en 

 culture une quantité d'eau un peu grande, la plus grande possible pour 

 ne pas dépasser ces limites. 



Avec des eaux peu microbiennes, on peut ensemencer 1 centimètre 

 cube, '2 centimètres cubes même. Avec des eaux plus riches, il faut en 

 mettre moins, et de moins en moins à mesure que l'on a affaire à des 

 eaux plus chargées; on ensemence 1/2, 1/4, 1/10, 1/20 de centimètre cube, 

 soit avec des pipettes jaugées pour de telles quantités, soit en usant de 

 pipettes donnant exactement 20 gouttes au centimètre cube et ense- 

 mençant alors 10, ."S, 2, 1 gouttes. Mêmeavecdes eauxtrès microbiennes, 

 eaux de rivières, de canaux, de puits, surtout eaux de mares ou d'égout, 

 eaux-vannes, il faut pousser plus loin la division. On dilue alors l'eau 

 à étudier dans une quantité déterminée d'eau stérilisée de façon à avoir 

 unedilutionà l/'10oul/100,en ajoutant 1 centimètre cubed'eauàexaminer 

 à centimètres cubes d'eau stérilisée, ou 1 centimètre cube à 09 centi- 

 mètres cubes, même plus haute pourdes eaux extrèmementmicrobiennes, 

 et on opère comme ci-dessus en ensemençant de cette dilution 1 centi- 

 mètre cube, 10, 5, 2, 1 gouttes. On tient compte naturellement du degré 

 de dilution pour établir les résultats. 



Quand on ne peut pas savoir approximativement la richesse micro- 

 bienne d'une eau à examiner, il faut faire une série de cultures avec des 

 quantités d'eaux graduellement décroissantes; par exemple, pour les 

 eaux potables, avec 20, 10,5, 2, 1 gouttes ; pour les eaux que l'on pense 

 être très riches, avec, en plus, des dilutions établies comme il vient 

 d'être dit. Si les cultures faites avec les taux supérieurs sont trop char- 

 gées de colonies, on s'adresse pour l'examen à celles faites avec des 

 quantités moindres. 



Quand il s'agit simplement d'isolement de colonies, on peut plus 

 simplement recourir à des dilutions successives faites directement avec 

 un premier ensemencement. Un tube est ensemencé avec la quantité 

 d'eau supposée convenable, puis, avec ce premier mélange, on obtient 

 une dilution en mélangeant une ou plusieurs gouttes du contenu du 

 tube à la gélatine d'un second ; puis de cette dilution une suivante, en 

 procédant de même et ainsi de suite en continuant lorsque les eaux 

 sont très riches en Bactéries. 



Au début, la gélatine, un peu refroidie pour la rendre visqueuse et 

 prête à se solidifier, était coulée sur des plaques de verre stérilisées 

 refroidies. Il est bien plus commode de n'employer que les petits cris- 

 tallisoirs plats, à couvercle, connus sous le nom de boites de Pétri 

 (I, p. 285) ; on évite ainsi bien mieux les contaminations par l'air. 



Pour éviter complètement les contaminations par l'air, on peut em- 

 ployer les flacons plats, fioles de Soyka ou boîtes de Roux (I, p. 286), 



