LES BACTERIES DE L E\U. 



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que Ton stérilise, munies de la quantité voulue de gélatine, fondue au 

 moment du besoin pour le mélange de l'eau à ensemencer. Toutefois, 

 les prélèvements de colonies sont difficiles, souvent impossibles avec 

 ces appareils. 



Dans le même but, Esmarch conseille de solidifier la gélatine à l'in- 

 térieur d'une grosse éprouvette où s'est fait l'ensemencement de l'eau, 

 commeilestditl, page 286. Ici aussi, ilestsouventdifficiled'atteindre les 

 colonies que l'on veut étudier, et lorsqu'il se trouve, ce qui est fréquent, 

 des espèces qui liquéfient la gélatine, le liquide produit coule bientôt 

 et vient troubler l'expérience. 



En somme, c'est l'emploi des boîtes de Pétri, avec un ensemble de 

 précautions pour éviter le plus possible une contamination étrangère, 

 qui paraît être de beaucoup le procédé le plus pratique. La gélatine 

 ensemencée y sera versée avec soin, en soulevant le couvercle aussi peu 

 qu'il est nécessaire, ne découvrant jamais entièrement la boîte. Du 

 reste, les contaminations sont peu fréquentes au début: plus communes 

 au contraire quand on veut examiner les colonies développées et qu'on 

 arrive alors à découvrir entièrement la boîte ; c'est ce qu'il faut faire 

 le moins possible. 



Les cultures sont mises à solidifier sur une plaque à vis calantes 

 pour que l'épaisseur de la gelée soit aussi régulière que possible 

 (I, p. 284). Lorsqu'elles ont bien fait prise, elles sont disposées sur une 

 petite étagère placée dans un endroit dont la température est d'environ 

 18°, au mieux 20°, en arrangeant un léger chauflage lorsque la tempé- 

 rature est par trop basse. Ces conditions se réalisent assez facilement dans 

 les laboratoires pendant la saison froide. En été, au contraire, la tem- 

 pérature s'y élève souvent trop ; on risque de voir les cultures fondre et 

 se détruire. 11 faut choisir un endroit plus frais, sous-sol ou même cave, 

 par exemple ; ou bien user d'installations refroidissantes, ce qui est 

 assez compliqué pour obtenir des elfets réguliers. Quand on dispose 

 d'eau dont la température ne dépasse pas 20", on peut se servir d'un 

 courant d'eau froide; autrement, il faut faire intervenir la glace et bien 

 souvent on obtient des températures trop basses, d'où retard dans le 

 développement (Voy. I, p. 318). Les cultures doivent être examinées 

 après quelque temps, à partir du moment où les colonies ont pu appa- 

 raître. 



D'ordinaire, les colonies apparaissent de vingt-quatre à trente-six 

 heures sous forme de petits points blancs. A un faible grossissement, ce 

 sont de petites taches discoïdes ou sphériques, blanches ou jaunâtres. 

 Elles ne prennent un aspect caractéristique que quelques jours après ; 

 cependant quelques espèces, liquéfiant la gélatine, se développent très 

 vite et atteignent rapidement leur maximum ; aussi doit-on suivre atten- 

 tivement les cultures à partir de la vingtième heure. C'est d'habitude 

 du deuxième au cinquième jour (jue les plaques doivent être étudiées 

 avec soin ; elles présentent souvent l'aspect indiqué par les figures 170 

 et 171. Ace moment, les caractères de beaucoup de colonies sont suffi- 

 sants pour permettre de les classer avec probabilité, sinon avec certi- 

 tude absolue. 



Pour éviter l'extension trop rapide de la liquéfaction de la gelée par 

 les colonies qui la déterminent, il est à recommander de retourner les 

 plaques de façon que la surface solide de la gelée soit en dessous. De 



