LES BACTÉRIES DE l'eAU. 809 



Pour obtenir un isolement certain, il faut faire plusieurs passages en 

 tubes de bouillon phéniqué, comme il a été dit page 130. 



Naturellement, dans toutes ces expériences, quelle que soit la 

 manière de faire employée, il est nécessaire d'établir un diagnostic 

 exact du microbe avant de se prononcer. 



Lorsque le trouble apparaît avant vingt-quatre heures, surtout de 

 seize à vingt heures, Texpérience démontre que dans la très grande 

 majorité des cas, peut-être au moins 95 p. 100, sinon plus, le Coli- 

 bacille est présent; à mesure que le trouble retarde, il peut être dû 

 à d'autres espèces. 



Le diagnostic du Colibacille se fait en recherchant les caractères 

 énumérés pages 143 et 192. En pratique, on s'attachera surtout à deux, 

 la fermentation en bouillon lactose et carbonate, la formation de Tindol 

 en milieux peplonisés. 



Recherche de ïindol. — La présence de Tindol donne les meilleurs 

 renseignements. On peut très avantageusement faire la recherche dans 

 le bouillon phéniqué lui-même, ce qui simplifie l'expérience ; il faut alors 

 attendre cinq ou six jours de culture pour obtenir une réaction nette. 

 En ensemençant, dès le trouble, dans du bouillon de peplone à 6 p. 100, 

 on peut l'obtenir beaucoup plus tôt et plus intense. 



On se sert de la réaction ordinaire, indol-nitreuse (I, p. 335), avec 

 emploi d'alcool amylique; ou mieux, parce que plus sensible, de la 

 réaction d'Ehrlich à la diméthylamidobenzaldéhyde (I, p. 337) ou du 

 procédé suivant. 



Procédé spécial. — J'ai observé qu'on obtenait un résultat aussi bon 

 qu'avec la méthode d'Ehrlich, en utilisant simplement l'acide azotique 

 chargé de vapeurs nit reuses. La réaction est beaucoup plus sensilîle 

 que celle que donne l'usage de nitrite de potassium et d'acide sulfu- 

 rique, aussi sensible à très peu près que celle d'Ehrlich et beaucoup 

 moins chère pour une grande pratique. A un tube à essai aux trois 

 quarts plein de bouillon à examiner, on ajoute cinq à six gouttes d'acide 

 azotique chargé de vapeurs nitreuses et on agite ; la coloration rouge 

 apparaît facilement, intense; lorscju'elle est faible, on la rend plus 

 manifeste avec un peu d'alcool amylique pur d'indol (I, p. 336). 



On obtient encore plus de netteté dans la réaction en opérant ainsi : 

 dans un tube à essai aux trois quarts rempli du bouillon, on ajoute de 

 l'alcool amylique pur d'indol de façon à obtenir une couche d'alcool de 

 2 centimètres de haut environ; on agite fortement et on laisse en repos 

 quelques instants pour permettre à l'alcool de se rassembler en bonne 

 partie au-dessus du bouillon. On laisse tomber l'acide nitrique en 

 gouttes. La coloration rouge apparaît dans la partie inférieure de l'alcool 

 et s'étend dans toute sa couche, beaucoup plus intense encore qu'avec 

 la première manière de faire. 



Dans cette recherche, on doit naturellement s'assurer d'avance que 

 les produits employés, les peptones, le bouillon, l'alcool amylique ne 

 contiennent pas d'indol; ce qui fausserait les résultats obtenus. 



Toutefois le Colibacille n'est pas seul à pousser dans ces conditions. 

 Il est toute une série d'espèces voisines qui font de même, qu'on peut 

 par conséquent obtenir et qu'il est d'un grand intérêt parfois de 

 difïérencier; c'est d'abord le Bacille typhique, puis à peu près toutes 

 les espèces du même groupe indiquées page 134. 



