§ 6. Verarbeitung von zusammengesetzten Zuckerarten und Glucosiden. 355 



Durchlüftung der Kultur und des Einflusses von bereits eintretendem Mangel 

 an Zucker können wohl ungezwungen auf einen vermehrten Austritt von 

 Invertin aus absterbenden Hyphen bezogen werden. Nach Fernbach 

 finden sich in den Zellen des Aspergillus trotz der Invertinproduktion kleine 

 Mengen von Rohrzucker, ein Befund, der noch näherer Analyse bedarf. 

 Bei der durch Hansen zuerst untersuchten Moniha Candida tritt keine 

 Spur von Invertin nach außen aus, hingegen kann man durch Zerreiben 

 der Zellen mit Glasstaub, wie Fischer zeigte (1), oder noch besser nach 

 Buchners Vorgang (2) durch Herstellung von Preßsaft, ^ wirksames In- 

 vertin in Lösung bringen. Jeder Hefepreßsaft enthält reichhch gut wirk- 

 sames Invertin (3). Es ist deshalb nicht angezeigt, mit Röhmann anzunehmen, 

 daß die Zellen nur Proinvertin enthalten, welches beim Austritte aus den 

 Zellen in wirksames Ferment übergeht (4). Ein wirkhch als Proferment 

 anzusprechendes Präparat hat Pantanelli (5) aus Mucor gewonnen und 

 gezeigt, daß es auch postmortal aktivierbar ist. Pringsheim und Zemplen 

 haben gezeigt, daß bei manchen Pilzen, trotz der notorischen Befähigung 

 Rohrzucker zu verarbeiten, dennoch nichts von den wirksamen Enzymen 

 im Preßsaft zu finden ist. Daraus darf man natürhch nicht schheßen, daß 

 die Polysaccharidverarbeitung hier ohne vorhergehende Hydrolyse statt- 

 findet, sondern wird zunächst diejenigen Faktoren ausfindig zu machen 

 haben, welche es bedingen, daß das Enzym nicht in den Preßsaft geht, 

 was ja auch bei anderen Endoenzymen häufig der Fall ist, oder wird nach 

 hemmenden Stoffen im Preßsaft zu suchen haben (6). 



Die Technik der Enzymdarstellung aus dem Hefeextrakt hat zwar 

 in neuerer Zeit namhafte Fortschritte gemacht, so daß wenige Enzyme 

 in so reinen und dabei sehr wirksamen Präparaten zugänglich sind wie das 

 Invertin ; doch ist man noch weit davon entfernt, ein sicher reines, von allen 

 nutzlosen Beimengungen freies Invertin zur Verfügung zu haben. Wro- 

 BLEWSKI reinigte das Invertin zuerst durch Aussalzen (7) und Ausdialy- 

 sieren, O'Sullivan und Thompson begründeten das auch jetzt noch im 

 Prinzip beibehaltene Verfahren der fraktionierten Fällung mit Alkohol (8), 

 worauf man nach Euler und Kullberg (9) das Eiweiß mit Bleiacetat und 

 sodann durch Adsorption mit Kaolin sehr weitgehend entfernen kann. 

 Hudson bereitet eine haltbare, nicht reduzierende Invertinlösung, indem 

 5 Pfund Hefe bei 20" mit 30 ccm Chloroform über Nacht stehen bleiben 

 und nach dem Abfiltrieren das Extrakt mit Bleiacetat gefällt wird. Der 

 Bleiüberschuß wird mit Calciumoxalat entfernt und nun unter Versetzung 

 mit Toluol die Dialyse eingeleitet; in saurer Lösung ist dieses Präparat 

 haltbar und sehr wirksam (10). Das Invertin ist gegen die Autodigestion der 

 Hefe sehr unempfindlich, wie Salkowski gezeigt hat (11), deswegen bietet 

 es keinen Vorteil die Hefe vor der Extraktion erst zu trocknen. Den Gehalt 



1) E. Fischer u. P. Lindner, Ber. Chem. Ges. (189.Ö), p. 3034. — 2) E. 

 Buchner u. Meisenheimer, Ztsch. physiol. Chem., 40, 167 (1903). — 3) Büchner, 

 Zymasegärung (1903). Wroblewski, Journ. prakt. Chem., 64, 1 (1901). — 4) F. 

 Röhmann, Ber. Chem. Ges., 27, 3251 (1894). — 5) Pantanelli, Accad. Line. Rom. 

 (5), 15, I, 587 (1906). Visser, Ztsch. physik. Chem., 52, 257 (1905). — 6) Prings- 

 heim u. Zemplen, Ztsch. physiol. Chem., 62, 367 (1909). G. E. Ritter, Biochem. 

 Ztsch., 42, 1 (1912). — 7) Wroblewski, Ber. Chem. Ges., j/, 1130 (1898). — 

 8) O'Sullivan u. Thompson, Journ. Chem. Soc. (1890), /, 834. — 9) Euler u. 

 Kullberg, Ztsch. physiol. Chem., 73, 335 (1911). Euler, Lindberg u. Melander, 

 Ebenda, 69, 152 (1910). — 10) C. S. Hudson, Ztsch. Ver. deutsch. Zuckerindustr. 

 (1910), p. 526; Journ. Amer. Chem. Soc, 30, 1564 (1908). — 11) E. Salkowski, 

 Ztsch. physiol. Chem., j/, 305 (1900); 61, 124 (1909). 



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