§ 5. Die Pigmente der Chloroplasten. 559 



form und andere organische Solventien. Hingegen vermag man mit 

 Petroläther oder Benzin aus frischen zerriebenen Blättern oder ge- 

 trocknetem Blattpulver nur einen gelben Auszug zu gewinnen, der aus- 

 schließlich das Carotin enthält, während die übrigen Pigmente in ihrer 

 Adsorptionsbindung verbleiben. Hat man jedoch das Material vorher 

 erhitzt, so wird auch der Benzinauszug grün gefärbt. Es genügt aber 

 auch, dem Petroläther etwas Alkohol zuzufügen, um sofort die grünen 

 Farbstoffe in Lösung zu bringen. Geradeso verliält sich an Filterpapier 

 adsorbiertes Blattextrakt gegenüber den organischen Lösungsmitteln. 

 Als TswETT mit CaCOg gefüllte Glasröhren als Adsorptionsvorrichtung 

 anwendete, konnte er bei der Filtration des Blätterauszuges durch diese 

 Adsorptionsschicht das Carotin ohne weiteres abtrennen, welches gelöst 

 blieb, während die anderen Pigmente, sich schichtenweise abtrennend, 

 in dem Calciumcarbonatpulver adsorbiert blieben (chromatographische 

 Methode von Tswett). Hierbei empfiehlt es sich, Schwefelkohlenstoff 

 als Lösungsmittel anzuwenden. Tswett konnte dabei folgende Ad- 

 sorptionszonen unterscheiden: L war farblos; IL enthielt das Xanthophyll/Ö 

 von gelber Farbe; HL enthielt das dunkelolivgrüne Chlorophyllin ß; 

 IV. enthielt das dunkelblaugrüne Chlorophyllin a. Die V. Zone schloß 

 zwei xanthophyllartige Pigmente ein, die VI. Zone war farblos und die 

 VII. Zone enthielt das orangefarbene Xanthophyll a. Das Carotin wurde 

 dem Schwefelkohlenstoff überhaupt nicht entzogen. Die Trennung aller 

 dieser Pigmente war immerhin so schaif, daß es möglich war, die spektro- 

 skopischen Unterschiede mit Deutlichkeit zu definieren. Zur Gewinnung 

 größerer Farbstoffmengen reicht natürlich die Adsorptionsmethode für 

 sich allein nicht aus. Hier hat, wenigstens zum Teil, die von Will- 

 STÄTTER ausgebildete Methodik erfolgreich eingegriffen. Carotin isoliert 

 man ohne weiteres durch Extraktion von trockenem Blattpulver mit Petrol- 

 äther, indem alle anderen Pigmente ungelöst bleiben. Xanthophyll wurde 

 von VViLLSTÄTTER(l) vojläufig noch nicht in eine Reihe von Fraktionen 

 aufgetedt. Man erhält es am besten, wenn man das alkoholische Blätter- 

 extrakt mit alkoholischer Natronlauge verseift, die grünen Verseifungs- 

 produkte mit Äther lallt und nun die alkohol-ätherischen Mutterlaugen 

 des Niederschlages mit viel Wasser auswäscht. Da gehen die grünen 

 Pigmente völlig in das Wasser über und es bleibt eine gelbe ätherische 

 Lösung zurück, die hauptsächlich Xanthophyll und ein wenig Carotin 

 enthält. Zur Gewinnung der beiden grünen Farbstoffe, die Willstätter 

 als das mehr blaugrüne „Chlorophyll a" und das mehr gelbgrüne „Chloro- 

 phyll b" bezeichnet(2), wird das Material nach vorausgegangener Behandlung 

 mit Benzol und Petroläther mit Alkohol extrahiert und nun im wesent- 

 lichen nach dem KRAusschen Entmischungsverfahren mit Petroläther in 

 zwei Fraktionen zerlegt, von welchen die petrolätherische in Arbeit 

 genommen wird. Nach oftmaliger Ausschüttelung mit wasserhaltigem 

 Holzgeist verbleibt das blaugrüne Chlorophyll a im Petroläther, während 

 das etwas gelblichgrüne Chlorophyll b in den Holzgeist übergeht. So 

 wurde endlich die bereits von Stokes(3) und besonders von Sorby 

 auf Grund von Entmischungsversuchen mit Alkohol und CSg mittelst spektro- 

 skopischer Untersuchungsmethodik (4), angenommene Unterscheidung von 



1) Willstätter u. Mieg, Lieb. Ann., 355, 1 (1907). — 2) Willstätter 

 u. HuG, Ebenda, 380, 177 (1911). Willstätter u. Isler, Ebenda, 390, 296 (1912). 

 — 3) ü. Stokes, Phil. Trans., 182, I, 4Ö3; Proceed. Roy. iSoc, 13, 144 (1864); Journ. 

 Chem. Soc, /;, 304 (1864;. — 4) H. Sorby, Proceed, Roy. Soc, 15, 433 (1867); 21, 

 442 (1873). 



