§ 7. Assimilation von Stickstoffgas. 199 



von Berthelot (1) her, welcher alsbald den Vorgang auf Mikroben 

 zurückführte, da die N-Fixation im Winter nicht zu beobachten war, 

 und durch Erhitzen auf 100° aufgehoben werden konnte. Berthelot 

 bezeichnete direkt Bacterien als die Urheber dieser Stickstoffanreiche- 

 rung. Ihm folgten darin Deh^rain und Maquenne(2), welche von 

 einem Buttersäureferment in der Ackerkrume berichteten und vielleicht 

 unreine Kulturen wirksamer Clostridien in Händen hatten, sowie Gautier 

 und Drouin (3) , während Schloesing (4) die Stickstoffixierung auf 

 unbebautem Boden überhaupt in Abrede stellte. Die Arbeiten Berthe- 

 lots fanden in der Folge durch Pagnoul, Tacke, Immendorff, Alpe 

 und Menozzi (5) Bestätigung. Jedoch scheiterten die Bemühungen 

 Berthelots die wirksamen Mikroben zu isolieren, und er kam dazu 

 eine ganze Reihe von Organismen, schließlich auch Schimmelpilze, mit 

 der Stickstoffixierung im Ackerboden in Verbindung zu bringen. Unter 

 diesen Verhältnissen war es ein großer Erfolg, als es Winogradsky (6) 

 1893 gelang, sein Clostridium Pasteurianum, einen großen, anaeroben, 

 dem Fitz sehen Bacillus butyricus ähnlichen Bacillus aus verschiedenen 

 Bodenproben zu isolieren, welcher sicher aus einer von Ammoniak usw. 

 sorgfältig befreiten Luft seinen Stickstoff bedarf zu decken vermag, und 

 hierbei in zuckerhaltiger Nährlösung Buttersäuregärung hervorruft. In 

 zwei Versuchen auf einem anfangs absolut N-freiem Substrate, das 4% 

 Zucker enthielt, betrug der N-Gewinn nach 20 bzw. 15 Tagen 28,87 mg 

 und 24,68 mg N. Winogradsky sprach die Vermutung aus, daß das 

 Bacterium im Plasma aus freiem Ng und nascierendem Hj, der bei der 

 Buttersäuregärung entsteht, zunächst NHg bilde. Sehr geringer Zusatz 

 von NHj oder Nitrat beschleunigte wohl die Zuckervergärung der Mi- 

 krobe, vermehrte jedoch nicht den endlichen N-Gewinn. Organische N- 

 Verbindungen waren wirkungslos. Fügte Winogradsky auf 100 g 

 Zucker mehr als 0,6g Ammoniak- oder Nitrat-N hinzu, so hörte die 

 Fixierung des Luftstickstoffes gänzlich auf. Unter den von Winogradsky 

 gebotenen Kulturbedingungen band das Clostridium auf je 1 g Glucose 

 etwa 2,5 bis 3 mg Luftstickstoff. Auf Gelatine wuchs das Clostridium 

 in WiNOGRADSKYs Kultureu nicht, sondern es mußte auf Möhrenscheiben 

 innerhalb einer flach ausgebreiteten Schichte zuckerhaltiger Flüssigkeit 

 kultiviert werden. Die Lösung bestand aus 1000g Wasser, lg Trika- 

 liumphosphat, 0,5g Magnesiumsulfat, 0,01 bis 0,02 g NaCl, FeSO^, MnSO^, 

 20 — 40 g Glucose, und CaCOg-Zufügung. Diese in fast allen Böden auf 

 der ganzen Erde nachgewiesene Mikrobe kommt nach Winogradsky in 



Prometheus, 26, 522 (1915). Eddelbüttel, Mykolog. Unters, u. Ber., i, 256 (1916). 

 Die stickstoffixierenden Bacterien können nach Lipman, Bot. Gaz., 51, 454 (1911), 

 als „Azotobacterien" zusammengefaßt werden. 



1) Berthelot, Compt. rend., loi, 775 (1885); 104, 205, 625 (1887); 106, 569, 

 1049, 1214 (1888); 107, 372 (1888); 108, 700 (1889); J09, 277, 417 (1889); 115, 569 

 (1892); jj-6,842 (1893). Ann. Chim. et Phys. (6), .?o, 419 (1893). Die N-Fixation 

 durch den Boden wurde auch von Nicolai, Justs Jahresber. (1883), T, 46, und 

 Strecker, Journ. Landw., j./, 1 (1886) bestätigt, doch ohne bestimmte Angabe, daß 

 der freie Luft-N fixiert werde. — 2) Deherain u. Maquenne, Bull. Soc. Chim., 

 39, 49 (1883). Deherain, Compt. rend., 108, 781, 873 (1889); joj, 1273 (1885). 

 Ann. Agron., 12, 17 (1886). — 3) Gautier u. Drouin, Compt. rend., 106, 754, 863, 

 944, 1098, 1174, 1233, 1605 (1888). —4) Th. Schloesing f., ebenda, 106, 805, 898, 

 982, 1123 (1888); 107, 290 (1888); 109, 210, 345 (1889). Boussingault. Agronomie, 

 7, 175. — 5) Pagnoul, Compt. rend., iio, 910 (1890). B. Tacke, Landw. Jahrb., 

 18, 439 (1888). H. Immendorff, Ebenda, 21, 281 (1892). Alpe u. Menozzi, Kochs 

 Jahresber. (1892), 213. — 6) S. Winogradsky, Compt. rend., 116, 1385 (1893); 118, 

 353 (1894). Arch. Sei. Biol. Petersburg, 3, 297 (1895)^ Zentr. Bakt., II, 9, 43 (1902). 



